第一部分Islet-1誘導C3H10T1/2心肌樣分化過程Akt參與干性維持的作用研究目的:探究在Islet-1誘導的C3H10T1/2心肌樣細胞分化過程中Akt與干性因子的表達調(diào)控是否相關。方法:在C3細胞中轉染過表達Islet-1的慢病毒,構建心肌樣細胞分化模型,通過反轉錄定量PCR（RT-qPCR）檢測蛋白激酶（Akt）及干性因子Sox2,Nanog的基因表達;western blotting檢測Akt及干性因子的蛋白表達;免疫熒光檢測干性因子及Akt的定位改變。采用Akt激活劑SC79與抑制劑MK2206分別作用于C3細胞,western blotting檢測p-Akt表達情況以摸索出藥物最佳濃度;以兩種藥物的最佳濃度分別作用于C3細胞后,RT-qPCR檢測干性因子基因表達,western blotting檢測干性因子蛋白表達,免疫熒光檢測干性因子定位改變。結果:轉入Islet-1后C3發(fā)生了心肌樣細胞分化,分化過程中Akt活性及入核量降低,但干性因子的基因表達、蛋白表達、細胞定位均未發(fā)生改變;摸索出的SC79最佳作用濃度為4ug/ml,MK2206最佳作用濃度為1umol/L... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

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21圖 2 Islet-1 蛋白表達水平Fig.2 protein level of Islet-1 expression2.2 轉染病毒后心肌早分化相關基因的表達轉染慢病毒后，連續(xù)培養(yǎng)四周，對心肌早期分化的標志進行 mRNA 水平和蛋白水平的檢測。RT-qPCR 結果提示，心肌早期分化標志 GATA4, Mef2C 在第三周

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文最高（圖 3），P<0.05，差異有統(tǒng)計學意義；免疫熒光結果顯示蛋白 cTnT 的表達，而肌聯(lián)蛋白 CX43 的表達較弱，轉入過表達出現(xiàn)了 cTnT 的表達（圖 4），CX43 的表達也大大增強（圖 5）et-1 后細胞在有心肌早期分化相關基因的 mRNA 表達，也有心肌的表達，C3 細胞出現(xiàn)心肌樣分化。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]杜仲葉提取物及其單體槲皮素、（+）-丁香脂素抑制BMSCs成脂分化研究[D]. 方寧.南昌大學 2014



本文編號：3459863