該研究以Zmpste24基因缺陷早衰小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（MEF）為模型,探索細(xì)胞核內(nèi)亞結(jié)構(gòu)PML NBs（promyelocytic leukemia nuclear bodies）與細(xì)胞衰老之間的關(guān)聯(lián)。在Zmpste24野生型（+/+）和缺陷型（-/-） MEF細(xì)胞中過表達(dá)GFP-PML1和GFP-PML2及對照GFP,通過傳代計(jì)數(shù)監(jiān)測細(xì)胞增殖,β-gal染色檢測細(xì)胞衰老,免疫熒光觀察PML NBs結(jié)構(gòu)形態(tài)、增殖標(biāo)志物Ki-67和DNA損傷應(yīng)答信號γH2AX。結(jié)果顯示,過表達(dá)PML2而非PML1顯著抑制Zmpste24^+/+和Zmpste24^-/- MEF細(xì)胞的增殖,降低Ki-67陽性細(xì)胞比例,削弱DNA損傷修復(fù)能力,加速細(xì)胞衰老。而且,過表達(dá)PML2促進(jìn)Zmpste24^-/- MEF細(xì)胞衰老的效應(yīng)比在Zmpste24^+/+細(xì)胞中更為顯著。此外,對比Zmpste24^+/+,在Zmpste24^-/- MEF細(xì)胞中過表達(dá)PML2可誘導(dǎo)更高比例的細(xì)胞產(chǎn)生線性P... 

【文章來源】：中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(06)CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

過表達(dá)PML2誘導(dǎo)產(chǎn)生線性PML NBs結(jié)構(gòu)

2.5 線性PML NBs促進(jìn)Zmpste24?/? MEF細(xì)胞衰老為進(jìn)一步弄清PML2介導(dǎo)的線性PML NBs結(jié)構(gòu)在細(xì)胞衰老中的作用,我們將過表達(dá)GFP-PML2的Zmpste24?/? MEF細(xì)胞中攜帶正常與異常NBs結(jié)構(gòu)的細(xì)胞,進(jìn)行對比分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),對比正常PML NBs結(jié)構(gòu)的細(xì)胞,線性NBs結(jié)構(gòu)的細(xì)胞中Ki-67陽性的比例顯著減少(圖5A),β-gal染色陽性比例顯著增多(圖5B),本底γH2AX foci數(shù)目(圖5C)以及X射線輻射損傷后未修復(fù)的γH2AX foci數(shù)目(圖5D)都明顯增多。結(jié)果表明,PML2介導(dǎo)形成的異常線性結(jié)構(gòu)可抑制Zmpste24?/? MEF細(xì)胞增殖,干擾其DNA修復(fù)能力,促進(jìn)細(xì)胞衰老。

本研究以Zmpste24基因缺陷早衰小鼠MEF細(xì)胞為模型,初步揭示了PML2介導(dǎo)的線性NBs干擾DNA修復(fù),促進(jìn)細(xì)胞衰老,這為探討PML NBs異常結(jié)構(gòu)在HGPS早衰癥中的作用及相關(guān)分子機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)及理論基礎(chǔ)。


本文編號：3455517