發(fā)布時間：2021-10-23 09:46

　　骨質(zhì)疏松癥是一種全身性代謝骨病,多見于絕經(jīng)后婦女和老年男性。STAT1是細胞因子信號傳導(dǎo)的下游通路,主要利用復(fù)雜的信號級聯(lián)來發(fā)揮其生物學(xué)作用,例如促進細胞死亡,抑制細胞生長等。本研究室發(fā)現(xiàn)STAT1基因和骨質(zhì)疏松癥之間具有關(guān)聯(lián)性,首次明確提出STAT1基因與人類骨質(zhì)疏松密切相關(guān)。人類STAT1基因和斑馬魚stat1基因具有高度同源性,因此本文選擇模式生物斑馬魚作為實驗生物。本實驗室已通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)分別敲除了斑馬魚的stat1a基因和stat1b基因,得到相對應(yīng)的突變品系。本文運用所得到的突變品系,篩選并建立stat1a^-/-和stat1b^-/-突變模型。通過雜交手段獲得斑馬魚stat1a/stat1b基因雙突變模型,并開展表型觀察及相關(guān)功能實驗。實驗發(fā)現(xiàn),敲除stat1a和stat1b基因后的純合單基因突變型幼魚早期胚胎死亡率較高,而且其成魚骨骼表型也有明顯變化,主要變化以下頜骨長度增加、脊柱尾部彎曲和尾鰭消失為主。而stat1a/stat1b基因雙突變型胚胎死亡率較野生型來說差異并不顯著,其成魚骨骼表型變化也不明顯。... 

【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

野生型與stat1bF2代突變體、stat1a17sanger測序峰圖以及序列對比圖

在 72h 之內(nèi)，分別敲除 stat1a 基因和 stat1b 基因之后，純合單的死亡率較野生型組明顯偏高。純合 stat1a/stat1b 雙基因突變高于野生型組，但低于純合單基因突變體組。從表中可以明育的前期：合子期（0-0.75h）、卵裂期（0.75-2.25h）和囊胚及胚胎發(fā)育的后期：咽囊期（24-48h）和孵化期（48-72h）這因突變體斑馬魚和純合雙基因突變體斑馬魚的死亡率和野生大差別。但在胚胎發(fā)育中期：原腸期（5.25-10h）和體節(jié)期（1生型斑馬魚還是純合單/雙基因突變體斑馬魚的死亡率較其他高，可見這兩個時期是胚胎發(fā)育的關(guān)鍵時期。從圖 3-3 可以得tat1a 基因或者 stat1b 基因后均會影響斑馬魚早期發(fā)育的過程，高，但將這兩個基因全敲除后死亡率反而沒有單基因突變體斑

碩士學(xué)位論文幼魚 Alcian blue 軟骨染色究純合 stat1a-17 突變體斑馬魚、stat1b-S3 突變體斑馬t1b 雙基因突變體斑馬魚幼魚的軟骨發(fā)育，分別取其七天的幼魚型斑馬魚幼魚，用阿爾新藍（Alcian blue）進行染色。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]白介素-17通過拮抗γ-干擾素的作用促進小鼠肝癌細胞的生長與增殖[J]. 李杰,閆堃,楊屹,李華,王志東,徐心.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2019(01)
[2]干擾素γ對星形膠質(zhì)細胞中JAK-STAT細胞信號通路的激活作用[J]. 韓浩,宣麗穎,白冬松,宋葆華,寶魯爾.  中國老年學(xué)雜志. 2018(19)
[3]干擾素γ及其受體與信號通路研究進展[J]. 冷婷婷.  甘肅科技縱橫. 2015(07)
[4]骨質(zhì)疏松治療藥物的研究進展[J]. 汪呈,曹宇,顧永清,張令強.  科學(xué)通報. 2014(13)
[5]骨質(zhì)疏松癥的流行病學(xué)趨勢與防治進展[J]. 胡軍,張華,牟青.  臨床薈萃. 2011(08)
[6]骨質(zhì)疏松癥的流行病學(xué)、病因和分類[J]. 文天林,孫天勝,王玲.  人民軍醫(yī). 2010(09)
[7]斑馬魚:在生命科學(xué)中暢游[J]. 孫智慧,賈順姬,孟安明.  生命科學(xué). 2006(05)



本文編號：3452968