斑馬魚(yú)stat1a/stat1b基因雙突變對(duì)骨骼發(fā)育的影響研究
發(fā)布時(shí)間：2021-10-23 09:46
骨質(zhì)疏松癥是一種全身性代謝骨病,多見(jiàn)于絕經(jīng)后婦女和老年男性。STAT1是細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)的下游通路,主要利用復(fù)雜的信號(hào)級(jí)聯(lián)來(lái)發(fā)揮其生物學(xué)作用,例如促進(jìn)細(xì)胞死亡,抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等。本研究室發(fā)現(xiàn)STAT1基因和骨質(zhì)疏松癥之間具有關(guān)聯(lián)性,首次明確提出STAT1基因與人類(lèi)骨質(zhì)疏松密切相關(guān)。人類(lèi)STAT1基因和斑馬魚(yú)stat1基因具有高度同源性,因此本文選擇模式生物斑馬魚(yú)作為實(shí)驗(yàn)生物。本實(shí)驗(yàn)室已通過(guò)CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)分別敲除了斑馬魚(yú)的stat1a基因和stat1b基因,得到相對(duì)應(yīng)的突變品系。本文運(yùn)用所得到的突變品系,篩選并建立stat1a-/-和stat1b-/-突變模型。通過(guò)雜交手段獲得斑馬魚(yú)stat1a/stat1b基因雙突變模型,并開(kāi)展表型觀察及相關(guān)功能實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),敲除stat1a和stat1b基因后的純合單基因突變型幼魚(yú)早期胚胎死亡率較高,而且其成魚(yú)骨骼表型也有明顯變化,主要變化以下頜骨長(zhǎng)度增加、脊柱尾部彎曲和尾鰭消失為主。而stat1a/stat1b基因雙突變型胚胎死亡率較野生型來(lái)說(shuō)差異并不顯著,其成魚(yú)骨骼表型變化也不明顯。...
【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
野生型與stat1bF2代突變體、stat1a17sanger測(cè)序峰圖以及序列對(duì)比圖
在 72h 之內(nèi)，分別敲除 stat1a 基因和 stat1b 基因之后，純合單的死亡率較野生型組明顯偏高。純合 stat1a/stat1b 雙基因突變高于野生型組，但低于純合單基因突變體組。從表中可以明育的前期：合子期（0-0.75h）、卵裂期（0.75-2.25h）和囊胚及胚胎發(fā)育的后期：咽囊期（24-48h）和孵化期（48-72h）這因突變體斑馬魚(yú)和純合雙基因突變體斑馬魚(yú)的死亡率和野生大差別。但在胚胎發(fā)育中期：原腸期（5.25-10h）和體節(jié)期（1生型斑馬魚(yú)還是純合單/雙基因突變體斑馬魚(yú)的死亡率較其他高，可見(jiàn)這兩個(gè)時(shí)期是胚胎發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期。從圖 3-3 可以得tat1a 基因或者 stat1b 基因后均會(huì)影響斑馬魚(yú)早期發(fā)育的過(guò)程，高，但將這兩個(gè)基因全敲除后死亡率反而沒(méi)有單基因突變體斑
碩士學(xué)位論文幼魚(yú) Alcian blue 軟骨染色究純合 stat1a-17 突變體斑馬魚(yú)、stat1b-S3 突變體斑馬t1b 雙基因突變體斑馬魚(yú)幼魚(yú)的軟骨發(fā)育，分別取其七天的幼魚(yú)型斑馬魚(yú)幼魚(yú)，用阿爾新藍(lán)（Alcian blue）進(jìn)行染色。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白介素-17通過(guò)拮抗γ-干擾素的作用促進(jìn)小鼠肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖[J]. 李杰,閆堃,楊屹,李華,王志東,徐心. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]干擾素γ對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞中JAK-STAT細(xì)胞信號(hào)通路的激活作用[J]. 韓浩,宣麗穎,白冬松,宋葆華,寶魯爾. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2018(19)
[3]干擾素γ及其受體與信號(hào)通路研究進(jìn)展[J]. 冷婷婷. 甘肅科技縱橫. 2015(07)
[4]骨質(zhì)疏松治療藥物的研究進(jìn)展[J]. 汪呈,曹宇,顧永清,張令強(qiáng). 科學(xué)通報(bào). 2014(13)
[5]骨質(zhì)疏松癥的流行病學(xué)趨勢(shì)與防治進(jìn)展[J]. 胡軍,張華,牟青. 臨床薈萃. 2011(08)
[6]骨質(zhì)疏松癥的流行病學(xué)、病因和分類(lèi)[J]. 文天林,孫天勝,王玲. 人民軍醫(yī). 2010(09)
[7]斑馬魚(yú):在生命科學(xué)中暢游[J]. 孫智慧,賈順姬,孟安明. 生命科學(xué). 2006(05)
本文編號(hào)：3452968
【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
野生型與stat1bF2代突變體、stat1a17sanger測(cè)序峰圖以及序列對(duì)比圖
在 72h 之內(nèi)，分別敲除 stat1a 基因和 stat1b 基因之后，純合單的死亡率較野生型組明顯偏高。純合 stat1a/stat1b 雙基因突變高于野生型組，但低于純合單基因突變體組。從表中可以明育的前期：合子期（0-0.75h）、卵裂期（0.75-2.25h）和囊胚及胚胎發(fā)育的后期：咽囊期（24-48h）和孵化期（48-72h）這因突變體斑馬魚(yú)和純合雙基因突變體斑馬魚(yú)的死亡率和野生大差別。但在胚胎發(fā)育中期：原腸期（5.25-10h）和體節(jié)期（1生型斑馬魚(yú)還是純合單/雙基因突變體斑馬魚(yú)的死亡率較其他高，可見(jiàn)這兩個(gè)時(shí)期是胚胎發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期。從圖 3-3 可以得tat1a 基因或者 stat1b 基因后均會(huì)影響斑馬魚(yú)早期發(fā)育的過(guò)程，高，但將這兩個(gè)基因全敲除后死亡率反而沒(méi)有單基因突變體斑
碩士學(xué)位論文幼魚(yú) Alcian blue 軟骨染色究純合 stat1a-17 突變體斑馬魚(yú)、stat1b-S3 突變體斑馬t1b 雙基因突變體斑馬魚(yú)幼魚(yú)的軟骨發(fā)育，分別取其七天的幼魚(yú)型斑馬魚(yú)幼魚(yú)，用阿爾新藍(lán)（Alcian blue）進(jìn)行染色。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白介素-17通過(guò)拮抗γ-干擾素的作用促進(jìn)小鼠肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖[J]. 李杰,閆堃,楊屹,李華,王志東,徐心. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]干擾素γ對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞中JAK-STAT細(xì)胞信號(hào)通路的激活作用[J]. 韓浩,宣麗穎,白冬松,宋葆華,寶魯爾. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2018(19)
[3]干擾素γ及其受體與信號(hào)通路研究進(jìn)展[J]. 冷婷婷. 甘肅科技縱橫. 2015(07)
[4]骨質(zhì)疏松治療藥物的研究進(jìn)展[J]. 汪呈,曹宇,顧永清,張令強(qiáng). 科學(xué)通報(bào). 2014(13)
[5]骨質(zhì)疏松癥的流行病學(xué)趨勢(shì)與防治進(jìn)展[J]. 胡軍,張華,牟青. 臨床薈萃. 2011(08)
[6]骨質(zhì)疏松癥的流行病學(xué)、病因和分類(lèi)[J]. 文天林,孫天勝,王玲. 人民軍醫(yī). 2010(09)
[7]斑馬魚(yú):在生命科學(xué)中暢游[J]. 孫智慧,賈順姬,孟安明. 生命科學(xué). 2006(05)
本文編號(hào)：3452968
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