低氧培養(yǎng)對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞影響的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
發(fā)布時間：2021-10-18 09:59
背景間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cells,MSC）具有很強的自我更新和多向分化潛能,能分泌多種生物活性因子,并有免疫調(diào)節(jié)和營養(yǎng)支持作用。雖然MSCs的許多基本生物學(xué)問題尚待明了,研究者們對其用于細胞移植治療和作為組織工程種子細胞的應(yīng)用前景倍感興趣。組織中MSCs的數(shù)量極少,無法滿足應(yīng)用所需細胞數(shù)。通過體外培養(yǎng)獲得干性正常、功能良好的足量MSCs,不論對其基礎(chǔ)研究或應(yīng)用研究,無疑是需要解決的首要問題之一。然而,目前這一問題的解決面臨極大的挑戰(zhàn),涉及諸多影響因素。體內(nèi)和體外兩方面研究的進展,使得干細胞培養(yǎng)體系的氧濃度成為人們關(guān)注的一個重要因素。其一,各種干細胞的組織微環(huán)境氧分壓顯著低于常規(guī)細胞培養(yǎng)體系（18%O2）;其二,在常規(guī)氧分壓培養(yǎng)條件下,MSC存在擴增效率低、DNA受損、易發(fā)生細胞衰老和凋亡等問題。近來的不少實驗結(jié)果提示了低氧對MSC體外培養(yǎng)的有益作用,但是其體外擴增效果距離理想仍相差甚遠。還有一些文獻報道,低氧培養(yǎng)條件不利于MSC的體外生存和生長。低氧程度、低氧暴露時間和細胞來源不同,是目前對MSC培養(yǎng)效果存在差異和不盡人意的常見解釋。...
【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：125 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
HIF-1在大氣氧條件下和在低氧條件下對轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)[110]
圖 2-1 傳代 rBMSC 細胞形態(tài)（A）相差顯微照片（標(biāo)尺為 50 μm）；（B）瑞氏-吉姆薩染色照片（標(biāo)尺為 50 μm）Fig.2-1 The morphology of passaged rBMSC.(A) A microphotograph of the rBMSC under an inverted phase-contrast microscope (Scale bar,50 μm); (B) A microphotograph of the Wright-Giemsa stained BMSC (Scale bar, 50 μm)2.4.1.2 三向分化潛能鑒定成脂誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21 d 后，油紅 O 染色，鏡н觀察（圖 2-2 A）：脂滴染色呈紅色，數(shù)目多，щ脂滴大，說明細胞已成功分化為脂肪細胞。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21d 后，茜素紅染色，鏡н觀察（圖 2-2 B）：已失去原有細胞形態(tài)特征，大部分呈鮮紅色，證實有鈣結(jié)節(jié)。成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21d 后，所得細胞團有 定硬度，石蠟包埋切片，阿利新藍染色，鏡н觀察（圖 2-2 C）：整個細胞團塊被染成藍綠色，細胞團緊致，邊緣齊整清晰，著色較深。
圖 2-1 傳代 rBMSC 細胞形態(tài)（A）相差顯微照片（標(biāo)尺為 50 μm）；（B）瑞氏-吉姆薩染色照片（標(biāo)尺為 50 μm）Fig.2-1 The morphology of passaged rBMSC.(A) A microphotograph of the rBMSC under an inverted phase-contrast microscope (Scale bar,50 μm); (B) A microphotograph of the Wright-Giemsa stained BMSC (Scale bar, 50 μm)2.4.1.2 三向分化潛能鑒定成脂誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21 d 后，油紅 O 染色，鏡н觀察（圖 2-2 A）：脂滴染色呈紅色，數(shù)目多，щ脂滴大，說明細胞已成功分化為脂肪細胞。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21d 后，茜素紅染色，鏡н觀察（圖 2-2 B）：已失去原有細胞形態(tài)特征，大部分呈鮮紅色，證實有鈣結(jié)節(jié)。成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21d 后，所得細胞團有 定硬度，石蠟包埋切片，阿利新藍染色，鏡н觀察（圖 2-2 C）：整個細胞團塊被染成藍綠色，細胞團緊致，邊緣齊整清晰，著色較深。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]識別多種種屬來源間充質(zhì)干細胞核酸適配體的篩選及鑒定[J]. 郭曉華,李章華,汪偉,董潔,丁紅梅,李少華,邵寧生. 軍事醫(yī)學(xué). 2017(03)
[2]低氧預(yù)處理骨髓間充質(zhì)干細胞耐受缺血缺氧的能力[J]. 徐巧巖,夏琳,王吉昌. 中國組織工程研究. 2013(49)
[3]大鼠骨髓MSCs表面分子檢測及誘導(dǎo)分化研究[J]. 王剛,呂同德,馬靜,常雅萍. 中國實驗診斷學(xué). 2008(01)
博士論文
[1]低氧微環(huán)境對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化影響的研究[D]. 黃姣.重慶醫(yī)科大學(xué) 2012
碩士論文
[1]低氧培養(yǎng)對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖的影響[D]. 熊蕾.湖南師范大學(xué) 2016
[2]低氧對人骨髓間充質(zhì)干細胞增殖及血紅素加氧酶-1表達的的影響[D]. 宋瑋瑋.蘭州大學(xué) 2010
本文編號：3442615
【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：125 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
HIF-1在大氣氧條件下和在低氧條件下對轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)[110]
圖 2-1 傳代 rBMSC 細胞形態(tài)（A）相差顯微照片（標(biāo)尺為 50 μm）；（B）瑞氏-吉姆薩染色照片（標(biāo)尺為 50 μm）Fig.2-1 The morphology of passaged rBMSC.(A) A microphotograph of the rBMSC under an inverted phase-contrast microscope (Scale bar,50 μm); (B) A microphotograph of the Wright-Giemsa stained BMSC (Scale bar, 50 μm)2.4.1.2 三向分化潛能鑒定成脂誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21 d 后，油紅 O 染色，鏡н觀察（圖 2-2 A）：脂滴染色呈紅色，數(shù)目多，щ脂滴大，說明細胞已成功分化為脂肪細胞。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21d 后，茜素紅染色，鏡н觀察（圖 2-2 B）：已失去原有細胞形態(tài)特征，大部分呈鮮紅色，證實有鈣結(jié)節(jié)。成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21d 后，所得細胞團有 定硬度，石蠟包埋切片，阿利新藍染色，鏡н觀察（圖 2-2 C）：整個細胞團塊被染成藍綠色，細胞團緊致，邊緣齊整清晰，著色較深。
圖 2-1 傳代 rBMSC 細胞形態(tài)（A）相差顯微照片（標(biāo)尺為 50 μm）；（B）瑞氏-吉姆薩染色照片（標(biāo)尺為 50 μm）Fig.2-1 The morphology of passaged rBMSC.(A) A microphotograph of the rBMSC under an inverted phase-contrast microscope (Scale bar,50 μm); (B) A microphotograph of the Wright-Giemsa stained BMSC (Scale bar, 50 μm)2.4.1.2 三向分化潛能鑒定成脂誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21 d 后，油紅 O 染色，鏡н觀察（圖 2-2 A）：脂滴染色呈紅色，數(shù)目多，щ脂滴大，說明細胞已成功分化為脂肪細胞。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21d 后，茜素紅染色，鏡н觀察（圖 2-2 B）：已失去原有細胞形態(tài)特征，大部分呈鮮紅色，證實有鈣結(jié)節(jié)。成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng) rBMSC 21d 后，所得細胞團有 定硬度，石蠟包埋切片，阿利新藍染色，鏡н觀察（圖 2-2 C）：整個細胞團塊被染成藍綠色，細胞團緊致，邊緣齊整清晰，著色較深。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]識別多種種屬來源間充質(zhì)干細胞核酸適配體的篩選及鑒定[J]. 郭曉華,李章華,汪偉,董潔,丁紅梅,李少華,邵寧生. 軍事醫(yī)學(xué). 2017(03)
[2]低氧預(yù)處理骨髓間充質(zhì)干細胞耐受缺血缺氧的能力[J]. 徐巧巖,夏琳,王吉昌. 中國組織工程研究. 2013(49)
[3]大鼠骨髓MSCs表面分子檢測及誘導(dǎo)分化研究[J]. 王剛,呂同德,馬靜,常雅萍. 中國實驗診斷學(xué). 2008(01)
博士論文
[1]低氧微環(huán)境對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化影響的研究[D]. 黃姣.重慶醫(yī)科大學(xué) 2012
碩士論文
[1]低氧培養(yǎng)對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖的影響[D]. 熊蕾.湖南師范大學(xué) 2016
[2]低氧對人骨髓間充質(zhì)干細胞增殖及血紅素加氧酶-1表達的的影響[D]. 宋瑋瑋.蘭州大學(xué) 2010
本文編號：3442615
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