目的以干酪乳桿菌（Lactobacillus casei,L.casei）胞外多糖（exopolysaccharides,EPS）為研究對象,研究其在體外對Balb/c小鼠小腸上皮細(xì)胞（small intestinal epithelial cell,IECs）增殖及其分泌IL-8、IL-10和TGF-β的影響。方法利用嗜熱菌蛋白酶消化聯(lián)合差速貼壁以及免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定的方法對Balb/c小鼠IECs進(jìn)行分離和鑒定,獲得實(shí)驗(yàn)用的IECs。用不同質(zhì)量濃度的L.casei EPS與IECs共培養(yǎng),分別觀察0.5、1、2 h和4 h后IECs的增殖情況。當(dāng)用不同質(zhì)量濃度的L.casei EPS處理IECs 2 h后,采用雙抗體夾心ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子IL-8、IL-10和TGF-β的質(zhì)量濃度。結(jié)果嗜熱菌蛋白酶消化聯(lián)合差速貼壁的方法能夠獲得純度高與活性好的IECs;L.casei EPS能夠促進(jìn)IECs的增殖,顯著上調(diào)上清液中IL-8、IL-10和TGF-β的分泌水平（P<0.05）,EPS質(zhì)量濃度在0¹50μg/ml范圍內(nèi)呈劑量依賴關(guān)系,并且在1... 

【文章來源】：免疫學(xué)雜志. 2013,29(10)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

倒置顯微鏡觀察IECs形態(tài)(×200)

值均隨著EPS質(zhì)量濃度的增加而增大，呈劑量依賴關(guān)系，且當(dāng)EPS質(zhì)量濃度為150μg/ml時，OD值最大，此時IECs密度最大，增殖最多；而當(dāng)EPS質(zhì)量濃度>150μg/ml時，OD值變小，IECs密度下降。因此，150μg/ml是促進(jìn)IECs增殖的最佳質(zhì)量濃度。隨著培養(yǎng)時間的延長，各質(zhì)量濃度EPS處理IECs的OD值均為先升高后降低。在0.5~2h的時間a)IECsculturedfor1d;b)IECsculturedfor2d;c)IECsculturedfor4d;d)IECsculturedfor6d.圖1倒置顯微鏡觀察IECs形態(tài)(×200)Fig1MorphologicfeatureofIECsobservedbyinvertedphasemicroscopy(×200)圖2IECs生長曲線Fig2ThegrowthcurveofIECs圖3IECs免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定(第6天,200×)Fig3ImmunocytochemistryofIECs(thesixthday,200×)圖4EPS與培養(yǎng)時間對IECs增殖的影響Fig4EffectsofEPSconcentrationandculturetimeonproliferationofIECs·837·

賴關(guān)系，且當(dāng)EPS質(zhì)量濃度為150μg/ml時，OD值最大，此時IECs密度最大，增殖最多；而當(dāng)EPS質(zhì)量濃度>150μg/ml時，OD值變小，IECs密度下降。因此，150μg/ml是促進(jìn)IECs增殖的最佳質(zhì)量濃度。隨著培養(yǎng)時間的延長，各質(zhì)量濃度EPS處理IECs的OD值均為先升高后降低。在0.5~2h的時間a)IECsculturedfor1d;b)IECsculturedfor2d;c)IECsculturedfor4d;d)IECsculturedfor6d.圖1倒置顯微鏡觀察IECs形態(tài)(×200)Fig1MorphologicfeatureofIECsobservedbyinvertedphasemicroscopy(×200)圖2IECs生長曲線Fig2ThegrowthcurveofIECs圖3IECs免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定(第6天,200×)Fig3ImmunocytochemistryofIECs(thesixthday,200×)圖4EPS與培養(yǎng)時間對IECs增殖的影響Fig4EffectsofEPSconcentrationandculturetimeonproliferationofIECs·837·


本文編號：3409780