目的:研究炎性環(huán)境下卵泡抑素樣蛋白1（FSTL1）對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（mBMSCs）成骨性能的影響。方法:將mBMSCs轉染慢病毒,改變細胞FSTL1的表達,通過CCK-8法檢測細胞增殖活性。轉染慢病毒的mBMSCs經(jīng)過10 ng/mL的腫瘤壞死因子α（TNF-α）刺激后,再予以成骨誘導;通過堿性磷酸酶（ALP）和茜素紅染色實驗,觀察mBMSCs的成骨能力的變化;通過實時定量PCR檢測細胞Ⅰ型膠原蛋白（Col1）、骨橋蛋白（Opn）、骨鈣素（Ocn）等成骨相關基因的表達。結果:通過慢病毒轉染能夠有效地改變mBMSCs內(nèi)Fstl1基因的表達,并且不影響細胞增殖活性（P>0.05）。在含有10 ng/mL TNF-α的炎癥環(huán)境中,與對照組相比,過表達FSTL1的m BMSCs成骨誘導后ALP和茜素紅染色變淺,成骨相關基因表達降低（P<0.05）;而敲減FSTL1的mBMSCs成骨誘導后ALP和茜素紅染色變深,成骨相關基因表達升高（P<0.05）。結論:FSTL1促進了炎癥對mBMSCs成骨性能的抑制作用,抑制FSTL1能有效地減輕炎癥對BMSCs的影響。 

【文章來源】：口腔生物醫(yī)學. 2020,11(02)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

慢病毒轉染m BMSCs觀察和檢測

TNF-α刺激不同慢病毒轉染的m BMSCs，然后進行成骨誘導分化。ALP染色結果顯示:成骨誘導3、7 d時，與has-NC組比較，has-LV-FSTL1組ALP染色面積減少，而has-FSTL1-RNAi組的ALP染色面積增加，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。茜素紅染色結果顯示:成骨誘導7、14 d時，與has-NC組比較，has-LV-FSTL1組礦化結節(jié)減少，而has-FSTL1-RNAi組礦化結節(jié)增加，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(圖3)。表明在炎癥條件下，過表達FSTL1能加強炎癥對m BMSCs成骨能力的抑制作用，而敲減FSTL1的表達則能減輕炎癥的抑制成骨作用。圖3 FSTL1對炎癥條件下m BMSCs礦化的影響

FSTL1對炎癥條件下m BMSCs礦化的影響


本文編號：3409557