目的將Prkra小耳（lear）小鼠動物模型用于先天性小耳畸形的研究,探討其作為動物模型在小耳畸形研究中的應用。將Bmp5短耳小鼠動物模型用于先天性小耳畸形的研究,探討其作為動物模型在小耳畸形研究中的應用。人類小耳畸形是一種先天性的耳畸形,可受遺傳和環(huán)境因素的影響,目前對其發(fā)病機制尚不清楚,我們希望通過測序分析小耳畸形患者的基因組信息,了解已知致病基因的突變與小耳畸形的關系,并進一步了解已知致病基因的突變與小耳畸形的關系。方法1.繁育Prkra小耳（lear）小鼠十只孕鼠,取胎齡在14.5天胎鼠尾進行的Sanger法測序,應用耳廓畸形和耳廓正常40天子鼠對比進行骨骼阿利新藍染色。2.Bmp5短耳（se）小鼠的Sanger法測序和Bmp5短耳（se）小鼠骨骼阿利新藍染色方法同Prkra小耳（lear）小鼠。3.本研究第三部分采用全基因組測序（WGS）技術,測序技術主要針對一對2歲同為右側小耳畸形雙胞胎姐妹的基因組進行測序分析,再應用第一代Sanger測序技術驗證。4.本研究第四部分采用人類全外顯子測序（WES）技術分析一個先天性小耳畸形遺傳家系,再應用第一代Sanger測序技術驗證。結果... 

【文章來源】：北京協和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１?Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠生長到４０天時，圖片左側為小耳畸形小鼠，圖片右??側兩只為同胞外耳正常小鼠

圖１?Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠生長到４０天時，圖片左側為小側兩只為同胞外耳正常小鼠。??Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠耳廓發(fā)育明顯較同胞小（如圖１鼠相比野生型或雜合型小鼠耳廓結構短小，Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ態(tài)與人類的先天性小耳畸形相比較類似，小耳小鼠耳廓發(fā)育很明顯。Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠耳廓表型也充分證明了?Ｐｒｋｒ育的影響，Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠位點的突變可以改變外這也是Ｐｒｋｒａ基因突變的發(fā)育效應。??２．?Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠基因突變測序??

ａａａＡＡａＡＡ．Ａａａａａ／＼ＡＡａａａａ??圖３測序峰圖分別是Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠野生型、雜合型和純合型??Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠的測序結果如圖３所示，突變位點在２號染色體７６，??６４３，?２１８ｂｐ（ＧＲＣｍ３８）上的Ｇ向Ａ的轉換，該突變位點位于第３外顯子之后，很??可能破壞了前ｍＲＮＡ的ＲＮＡ剪接［２７）遺傳背景上發(fā)現的一種新的突變型，該突??變可導致體型小、外耳短小等表型。Ｐｒｋｒａ小耳（ｌｅａｒ）小鼠突變體是自發(fā)的，與??條件性點突變小鼠模型相比

【參考文獻】：
期刊論文
[1]雙側外耳缺失伴發(fā)外耳道閉鎖豬動物模型的鑒定及其應用[J]. 潘博,喬瑞敏,楊美蓉,王長琛,張曄,李川,蔣海越.  中華整形外科雜志. 2018 (03)



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