目的:通過活細(xì)胞標(biāo)記和流式細(xì)胞術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用,建立一種方法研究體外巨噬細(xì)胞的吞噬活性。方法:研究采用活細(xì)胞示蹤染料CFSE標(biāo)記對照組巨噬細(xì)胞,對未標(biāo)記CFSE的細(xì)胞使用免疫刺激劑LPS處理,兩組細(xì)胞混勻后與預(yù)先超聲處理過的Alexa594標(biāo)記的大腸桿菌孵育,在一個體系中完成吞噬過程,流式細(xì)胞術(shù)檢測雙熒光信號來評價對照組細(xì)胞和LPS處理后細(xì)胞的吞噬活性。結(jié)果:對照組和LPS處理組巨噬細(xì)胞的吞噬率分別為48.6%和62.3%,LPS處理后巨噬細(xì)胞的吞噬活性明顯升高,與文獻(xiàn)報道一致。實驗表明,通過活細(xì)胞標(biāo)記區(qū)分,在同一體系中完成LPS處理和未處理細(xì)胞的吞噬活性檢測是非�？尚械�。也正因為待比較吞噬活性的兩組細(xì)胞處在同一個吞噬環(huán)境中,吞噬率反映的吞噬活性更為準(zhǔn)確。結(jié)論:本研究應(yīng)用活細(xì)胞標(biāo)記和流式細(xì)胞術(shù),成功建立了一種實現(xiàn)體外處理的巨噬細(xì)胞吞噬活性的檢測方法,簡便、準(zhǔn)確、可信度高。 

【文章來源】：中國免疫學(xué)雜志. 2020,36(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

熒光標(biāo)記的大腸桿菌超聲處理后熒光顯微鏡下觀察(×400)

熒光顯微鏡下觀察CFSE染色的RAW264.7細(xì)胞(×200)

巨噬細(xì)胞在不同吞噬條件下的吞噬率

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力的方法學(xué)探討[J]. 陳東亞,陸羅定,俞萍,卞倩,徐軍,楊明晶.  中國免疫學(xué)雜志. 2014(08)
[2]流式細(xì)胞術(shù)檢測大鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能方法探討[J]. 王愛清,萬建美,彭麗,田海林,李冰燕.  激光雜志. 2014(01)
[3]牛白細(xì)胞黏附缺陷病的牛白細(xì)胞功能檢測[J]. 曹宏偉,馬金柱,夏紅兵,張大生,朱戰(zhàn)波,崔玉東,樸范澤.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2009(03)



本文編號：3383157