發(fā)布時間：2021-09-02 15:15

　　鮑曼不動桿菌（Acinetobacter baumannii,Ab）屬于革蘭氏陰性菌,是引起醫(yī)院感染的重要病原菌。近年來耐藥Ab出現(xiàn)的比率不斷上升,公眾對此產(chǎn)生關注。本研究首次將Tn7轉(zhuǎn)座子與dif序列結(jié)合,一步法成功構建出一種無抗性標記的自主發(fā)光鮑曼不動桿菌（unmarked autoluminescent Ab,UAlAb）,其基因組中含有能表達自主發(fā)光蛋白的基因luxCDABE,不需添加任何外源底物就可以自主發(fā)光,在黑暗條件下通過肉眼就能觀察到發(fā)光。傳統(tǒng)切除抗性標記的位點特異性重組方法都需要人工額外表達外源解離酶或者轉(zhuǎn)座酶,Ab本身在增殖過程中會產(chǎn)生Xer解離酶,該酶可以識別dif序列從而切除序列之間的抗性基因,無需額外表達外源蛋白,操作簡單方便,省去了中間很多不必要的麻煩。Xer重組系統(tǒng)用于切除抗性基因近幾年才被報道,且大多用于分枝桿菌屬的遺傳操作,尚未見任何報道將其應用于Ab。本研究結(jié)果表明,構建的UAlAb其生理狀態(tài)與親本Ab（parent Ab,pt-Ab）相近,插入的基因?qū)ζ渖L不產(chǎn)生顯著影響,可以通過檢測相對發(fā)光單位（relative light units,RLUs... 

【文章來源】：中國科學技術大學安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３不同菌株中／？．ｖ基因的結(jié)構??（來源?Ｅｄｗａｒｄ?Ａ．?Ｍｅｉｇｈｅｎ．Ｍ／ｃ／ｒ？６７〇／０ｇ／ｃｆｌ／ｉ＾ｖｚｅｖｕｓ．?１９９１，ｐｌ２３－１４２．）??

圖１．４?Ｔｎ７的結(jié)構１６４１??

（來源于?Ｐｕｂｌｉｃ?Ｈｅａｌｔｈ?Ｉｍａｇｅ?Ｌｉｂｒａｒｙ）??１．５．３結(jié)核分枝桿菌的致病機理??Ｍｔｂ通常感染人的肺部，當ＴＢ患者咳嗽、打噴嚏、說話或吐痰時，含有Ｍｔ的唾液飛沫就會通過空氣傳播，被周圍的人吸入，這些含有Ｍｔｂ的細小液滴主通過呼吸道進入人體。感染Ｍｔｂ并最終形成肺結(jié)核取決于以下四個連續(xù)的過程：??１）?Ｍｔｂ的吞噬作用２）?Ｍｔｂ的細胞內(nèi)增殖３）潛伏的感染階段４）活躍的肺部染。這些過程分別對應著不同的臨床狀況：自發(fā)治愈，疾病，潛伏感染以及再活或再感染［９５］。免疫能力受損的個體一旦感染Ｍｔｂ就很容易患上活動性ＴＢ，其是艾滋病患者。然而，沒有涉及人類免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）?／ＴＢ共感染個體臨床狀況需要視具體情況而定。通常情況下，Ｍｔｂ侵染機體后會被機體的免疫統(tǒng)大量清除，但其可以通過免疫逃逸的方式在機體中存活。Ｍｔｂ通過抑制溶酶與吞噬體融合的方式進行逃逸。吞噔的Ｍｔｂ分泌的絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶（ＰｋｎＧ）直接抑制吞噬體與溶酶體的融合，同時，對核轉(zhuǎn)錄因子（ＮＦ－ｋＢ）的制也會間接降低這種融合［９６］。作為吞噬體表面的重要組分，３－磷酸磷脂酰肌

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Antimicrobial resistance in Acinetobacter baumannii : From bench to bedside[J]. Ming-Feng Lin,Chung-Yu Lan.  World Journal of Clinical Cases. 2014(12)

博士論文
[1]多重耐藥鮑曼不動桿菌基因組與“耐藥島”的比較基因組學研究[D]. 許攀峰.浙江大學 2012



本文編號：3379242