目的:中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nerve system,CNS）的視神經(jīng)損傷后其軸突無法再生,也使其成為阻礙視覺相關(guān)功能恢復(fù)的一大重要障礙。最近有研究發(fā)現(xiàn)通過基因工程介導(dǎo)的方法阻斷神經(jīng)再生抑制性基因的表達(dá),具有明顯促進(jìn)中樞視神經(jīng)再生的治療作用,但是目前人體內(nèi)較難實現(xiàn)對于特定組織靶基因的敲除,因而其臨床應(yīng)用仍有待進(jìn)一步探究。本研究希望尋找一種基于神經(jīng)營養(yǎng)因子,并具有臨床應(yīng)用前景的基因治療方法來促進(jìn)視神經(jīng)的軸突再生�；谛∈笠暽窠�(jīng)損傷研究模型,我們發(fā)現(xiàn)骨橋蛋白（Osteopontin,OPN）具有增強(qiáng)多種神經(jīng)營養(yǎng)因子的促再生效果。隨后,我們以營養(yǎng)因子IGF-1（Insulin-like growth factor-1,IGF-1）為例,對OPN如何促進(jìn)IGFR信號通路效應(yīng)進(jìn)行研究。我們旨在探究OPN促再生的作用位點,以及尋找誘導(dǎo)OPN作用于IGFR通路的分子靶點。方法:（1）篩選OPN和不同神經(jīng)營養(yǎng)因子的促再生協(xié)同作用。我們通過向眼球玻璃體內(nèi)注射神經(jīng)營養(yǎng)因子重組蛋白（IGF-1,NGF,BDNF,NT3,CNTF）或聯(lián)合注射表達(dá)骨橋蛋白的腺相關(guān)病毒（adeno-associated ... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：132 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元示意圖

是由細(xì)胞體延伸出去的一類較細(xì)的結(jié)構(gòu)，樹突通常可以生長延長至末端可有多可分枝結(jié)構(gòu)[3]。樹突是神經(jīng)元的信息接收工具，主要作用神經(jīng)元的動作電位信號傳送至細(xì)胞體。軸突則是神經(jīng)元的信號發(fā)送是將電信號或者化學(xué)遞質(zhì)傳送給不同的樹突、肌肉和腺體等[4]。大部突外有髓鞘（myelin sheath）包裹，相鄰髓鞘包裹間存在間隙稱之為s of Ranvier）[5]。郎飛結(jié)通常是鈉通道、鉀通道和其他分子特異性分容易被激活，因此軸突上信號傳遞主要通過郎飛結(jié)呈現(xiàn)跳躍式傳遞包裹的軸突上信號傳遞速度更快[6]。軸突的末梢部位有大量突觸泡，體合成并轉(zhuǎn)運(yùn)過來的神經(jīng)遞質(zhì)分子，這些神經(jīng)遞質(zhì)在突觸前膜產(chǎn)生鈣離子通道將其去極化轉(zhuǎn)化成神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，這一過程稱為興奮Excitation-secretion coupling）。神經(jīng)遞質(zhì)被通過胞吐作用釋放到突觸到突觸后膜，并與其上的特異性神經(jīng)遞質(zhì)受體結(jié)合完成神經(jīng)傳導(dǎo)過

F-actin 拉伸延長從而與粘附至細(xì)胞外基質(zhì)，正是這個由肌動蛋白-肌球蛋白分子發(fā)動機(jī)產(chǎn)生的拉力使得軸突可以有效的向前生長[19]。軸突生長錐不能有效再生，一個重要原因是中樞神經(jīng)損傷會引起軸突胞內(nèi)遠(yuǎn)端與近端 Ca2+離子內(nèi)流，如圖 1.3（b）。Ca2+胞內(nèi)濃度增高，主要是因為：一、軸突末端的細(xì)胞膜被破壞后 Ca2+離子滲入軸突細(xì)胞內(nèi)；二、細(xì)胞膜去極化，從而激活電壓門鈣離子通道使得胞內(nèi)如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)儲存的 Ca2+離子釋放，進(jìn)一步加劇軸突內(nèi)Ca2+濃度上升。Ca2+離子的內(nèi)流使得軸突胞內(nèi) Ca2+離子濃度升高，繼而誘發(fā)軸突內(nèi)一系列改變，例如：微管與肌動蛋白的解聚（depolarization）；軸突末端破損細(xì)胞膜加速封閉（membrane seal）并膨脹從而形成回縮生長錐（retraction bulbs）；激活鈣蛋白酶；激活局部蛋白翻譯等[20]。圖 1.3（a）展示了正常軸突內(nèi)各種成分參與形成生長錐的過程；圖 1.3（b）展示了軸突末端細(xì)胞膜被破壞后，Ca2+離子的內(nèi)流情況[21]。


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