目的:探討配對盒基因2（paired box 2,Pax2）對小鼠胚胎間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及成骨向分化能力的影響。方法:本實驗采用小鼠胚胎間充質(zhì)干細(xì)胞系C3H/10T1/2及原代培養(yǎng)的小鼠骨皮質(zhì)來源間充質(zhì)干細(xì)胞（mouse compact bone-derived mouse MSCs,mMSCs）,對細(xì)胞行體外成骨誘導(dǎo)后,采用蛋白質(zhì)印跡法（Western Blotting,WB）及細(xì)胞免疫熒光檢測Pax2在成骨誘導(dǎo)過程中的原始表達(dá),免疫組化檢測C57BL/6小鼠胚胎期17.5天（E17.5）及出生后21天（P21）脛骨切片Pax2的表達(dá)。重組慢病毒轉(zhuǎn)染C3H/10T1/2及mMSCs敲低Pax2,CCK-8法、流式細(xì)胞術(shù)檢測Pax2對細(xì)胞增殖、周期及凋亡的影響;實時定量PCR、WB檢測成骨相關(guān)基因表達(dá);堿性磷酸酶（ALP）及茜素紅（ARS）染色檢測礦化影響。生物信息學(xué)（Genomatix數(shù)據(jù)庫）預(yù)測Pax2在Runx2啟動子區(qū)域的結(jié)合位點,熒光素酶報告基因檢測Runx2的轉(zhuǎn)錄活性。WB及細(xì)胞免疫熒光進(jìn)一步檢測MAPK信號通路相關(guān)基因（ERK,JNK,p38）磷酸化表達(dá)水平。利用BALB/... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖IV日ri日l七onB

Pax2在C3H/10T1/2細(xì)胞和mMSCs成骨向分化中胞內(nèi)表達(dá)逐漸增高（標(biāo)尺：50μm）

Pax2在小鼠脛骨成骨細(xì)胞中的表達(dá)（標(biāo)尺：50μm）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]組織工程修復(fù)區(qū)早期牙移動壓力側(cè)牙周組織的改建[J]. 李一涵,張飛飛,包世婕,魏斌,宮耀.  上�？谇会t(yī)學(xué). 2018(05)



本文編號：3355815