目的新型鼠疫疫苗包含鼠疫減毒菌EV株培養(yǎng)提取的天然F1抗原。研究生理氯化鈉溶液中F1抗原的生物與理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)概況及聚合狀態(tài)等特性,以期對F1抗原的制備、質(zhì)量控制及其免疫原性研究提供理論依據(jù)。方法①過碘酸-希夫（PAS）染色法、糖蛋白碳水化合物估測試劑盒鑒定F1抗原是否為糖蛋白,蒽酮-硫酸法定量測定F1抗原中多糖含量,基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）技術(shù)測定F1抗原單體相對分子質(zhì)量并與理論值差異比對,間接證明F1抗原是否糖基化;②高效分子排阻色譜法聯(lián)用多角度激光散射（HPSEC-MALLS）法研究保存于生理氯化鈉溶液中F1抗原的天然聚集狀態(tài);③搜索GeneBank獲得鼠疫菌F1抗原的核苷酸序列,經(jīng)DNAStar軟件翻譯出氨基酸序列,并通過肽段覆蓋率驗證成熟F1抗原的氨基酸序列,以圓二色譜試驗結(jié)合K2D2軟件推測二級結(jié)構(gòu),MALDI-TOF-MS測定單體相對分子質(zhì)量。結(jié)果①鑒定出F1抗原單體相對分子質(zhì)量為15 500的蛋白質(zhì),不含有多糖成分;②F1抗原的相對分子質(zhì)量分布范圍在10⁶～10⁷之間,呈現(xiàn)聚集狀態(tài);③F1抗... 

【文章來源】：微生物學免疫學進展. 2020,48(03)

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【部分圖文】：

染色法鑒定糖蛋白

MALDI-TOF-MS測定F1抗原的單體相對分子質(zhì)量為15 562,與理論值15 563相一致。即F1抗原為不含多糖成分的蛋白質(zhì),見圖2。2.2 F1抗原的天然狀態(tài)研究

結(jié)果顯示, F1抗原從外水體積處開始出峰,并持續(xù)進入到內(nèi)水體積,峰型類似于拖尾,表明F1抗原以較大相對分子質(zhì)量存在,并呈現(xiàn)不均一的形態(tài),見圖3。2.2.2 F1抗原的HPSEC-MALLS分析

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3350542