動(dòng)物鼻式氣溶膠暴露裝置在病原感染動(dòng)物模型中的應(yīng)用及評(píng)價(jià)
發(fā)布時(shí)間:2021-07-25 23:47
目的 對(duì)動(dòng)物鼻式氣溶膠暴露裝置進(jìn)行性能評(píng)價(jià),并驗(yàn)證裝置消毒滅菌效果,為生物安全實(shí)驗(yàn)及感染性活動(dòng)提供安全保障。方法 選擇對(duì)人不致病的大腸桿菌(Escherichia coli,E.coli)和鼠肝炎病毒(Mouse hepatitis virus,MHV)分別代表細(xì)菌、病毒為模式微生物,通過(guò)動(dòng)物鼻式氣溶膠暴露裝置產(chǎn)生E.coli氣溶膠和MHV氣溶膠,評(píng)價(jià)氣溶膠產(chǎn)生效果及活力。分別用75%乙醇?xì)馊苣z和3%過(guò)氧化氫氣溶膠對(duì)系統(tǒng)消毒,評(píng)價(jià)消毒滅菌效果。分別采集暴露艙內(nèi)、設(shè)備連接處易發(fā)生泄露部位及消毒后氣溶膠。對(duì)E.coli氣溶膠采集樣本進(jìn)行微生物培養(yǎng)及菌落計(jì)數(shù);對(duì)MHV氣溶膠采集液提取RNA,qRT-PCR檢測(cè)樣本中病毒RNA。結(jié)果 裝置產(chǎn)生的E.coli氣溶膠顆粒中值直徑為(1.27±0.61)μm,暴露艙內(nèi)采樣液涂板有菌落生長(zhǎng),置于暴露艙不同端口的NC膜上菌落數(shù)無(wú)顯著性差異,易泄露處的沉降平皿及消毒后的采樣平皿上均無(wú)菌落生長(zhǎng)。暴露艙內(nèi)采樣液中的MHV病毒RNA為陽(yáng)性,易發(fā)生泄露處及消毒后采樣液中病毒RNA為陰性。結(jié)論 動(dòng)物鼻式氣溶膠暴露裝置能正常運(yùn)行,產(chǎn)生(1.27±0.61)μm的氣溶膠...
【文章來(lái)源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:118 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1鼻式氣溶膠暴露裝置簡(jiǎn)圖
.2.2氣溶膠到達(dá)暴露艙端口評(píng)價(jià)??將6.5?mL上述備好的大腸桿菌懸浮液倒入暴露裝置氣溶膠發(fā)生器的霧化小內(nèi),設(shè)置霧化流量為〇.6L/min,稀釋流量為18.3L/min,排氣流量為20L/min,壓力為20PSI,采樣流量為2.2L/min,維持暴露艙內(nèi)微負(fù)壓,以2mLLB液體培??基作為采樣液,系統(tǒng)運(yùn)行5min后,液體撞擊采樣器采樣20?min。分別取采樣液1??L涂于兩個(gè)LB固體培養(yǎng)基上,于37°C下培養(yǎng)12?h,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落,評(píng)價(jià)暴露艙端口是否有氣溶膠通過(guò)。??.2.3氣溶膠分布均勻性評(píng)價(jià)??動(dòng)物放射狀鼻式暴露艙共4層,每層隨機(jī)選。硞(gè)端口放置一個(gè)固定管(如1-1D,圖?1-2?所示),取 ̄1?cm2?的?NC?膜(Nitrocellulose?membrane,NC?膜)置于鼠固定器前端端口處采樣20?min。將NC膜放于LB固體培養(yǎng)基上,于37°C下培12?h,觀察NC膜上是否有菌落生長(zhǎng)并計(jì)數(shù),評(píng)價(jià)暴露艙各端口是否均有氣溶膠達(dá),氣溶膠分布是否均勻。其他參數(shù)設(shè)置同2.2.2。??
小鼠體重變下降率均超過(guò)25%?(執(zhí)行仁慈終點(diǎn)),感染后11?d內(nèi)小鼠存活率為0%。??實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,小鼠暴露于甲型H1N1流感病毒氣溶膠下的時(shí)間可設(shè)置為多25?min。??(如圖2-3所示)??A?t????...t?U?2?4?6?*?10?12?M??????iiiui?<?mm?★?10?iiuii?I'?mui???20?imn?2?mm???<?min?★?10?iiiui?15?nim?令?20?mm??^?2'?nnn?S-?U)?mm?金?P?mui?^?r.?:3l?〇?uim?Q??〇?iuih?古luul?子中I??圖2-?3?H1N1氣溶膠暴露不同時(shí)間后小鼠體重變化率及存活率圖??Figure?2-?3?Weight?change?and?survival?rates?of?mice?for?different?times?post?exposure??注:A:?H1N1氣溶膠暴露不同時(shí)間后小鼠體重變化率圖(><0.05,…p<0.001/…p<0.0001);?B:??H1N1氣溶膠暴露不同時(shí)間后小鼠存活率圖(…p<0.001,""p<0.0001)。??Note.?A,?the?weight?change?of?H1N1?post-exposure?mice?for?different?times.?(*p<0.05,?***p<0.001,??…*p<0.0001).?B
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]動(dòng)物鼻式氣溶膠暴露裝置的運(yùn)行效果評(píng)價(jià)[J]. 郝新彥,向志光,高虹. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2018(09)
[2]動(dòng)物氣溶膠暴露裝置的特點(diǎn)及其應(yīng)用[J]. 郝新彥,張?jiān)?高虹. 中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備. 2018(01)
[3]微生物氣溶膠采集技術(shù)的特點(diǎn)及應(yīng)用[J]. 王彥杰,李琳,許光素,劉俊新,韓云平. 微生物學(xué)通報(bào). 2017(03)
[4]動(dòng)物氣溶膠吸入暴露裝置的研制[J]. 李勁松,楊文慧,何春雷,李娜,王潔,胡凌飛,李金忠,張珂. 中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備. 2016(09)
[5]MERS-CoV動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J]. 藍(lán)佳明,鄧瑤,譚文杰. 病毒學(xué)報(bào). 2016(03)
[6]不同劑量DPP4轉(zhuǎn)導(dǎo)后MERS-CoV感染小鼠模型的臨床及生物學(xué)特征比較[J]. 姚艷豐,藍(lán)佳明,李楓棣,牛培華,于品,盧帥,鮑琳琳,譚文杰,秦川. 病毒學(xué)報(bào). 2015(06)
[7]全身暴露動(dòng)態(tài)吸入染毒系統(tǒng)的建立與評(píng)價(jià)[J]. 聶志勇,隋昕,孫曉紅,王小平,王永安. 軍事醫(yī)學(xué). 2014(10)
[8]手機(jī)大腸菌群污染狀況調(diào)查及消毒方法研究[J]. 張濛,張廣偉,張秀麗. 環(huán)境衛(wèi)生學(xué)雜志. 2014(01)
[9]一種復(fù)方鄰苯二甲醛消毒劑對(duì)遺體表面消毒效果觀察[J]. 楊德慧,周雪媚,姜思朋,王永闊,劉國(guó)軍,李伯森,鐘照華,林樂(lè)勛,李玉光. 中國(guó)消毒學(xué)雜志. 2011(02)
[10]實(shí)驗(yàn)雪貂飼育籠的設(shè)計(jì)與應(yīng)用[J]. 和占龍,沈繼武,趙遠(yuǎn),魯帥堯,禹文海,王俊斌,陳麗雄. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2010(09)
博士論文
[1]MERS-CoV感染hDPP4轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立及免疫病理?yè)p傷機(jī)制研究[D]. 姜玉庭.軍事科學(xué)院 2018
本文編號(hào):3303013
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圖1-1鼻式氣溶膠暴露裝置簡(jiǎn)圖
.2.2氣溶膠到達(dá)暴露艙端口評(píng)價(jià)??將6.5?mL上述備好的大腸桿菌懸浮液倒入暴露裝置氣溶膠發(fā)生器的霧化小內(nèi),設(shè)置霧化流量為〇.6L/min,稀釋流量為18.3L/min,排氣流量為20L/min,壓力為20PSI,采樣流量為2.2L/min,維持暴露艙內(nèi)微負(fù)壓,以2mLLB液體培??基作為采樣液,系統(tǒng)運(yùn)行5min后,液體撞擊采樣器采樣20?min。分別取采樣液1??L涂于兩個(gè)LB固體培養(yǎng)基上,于37°C下培養(yǎng)12?h,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落,評(píng)價(jià)暴露艙端口是否有氣溶膠通過(guò)。??.2.3氣溶膠分布均勻性評(píng)價(jià)??動(dòng)物放射狀鼻式暴露艙共4層,每層隨機(jī)選。硞(gè)端口放置一個(gè)固定管(如1-1D,圖?1-2?所示),取 ̄1?cm2?的?NC?膜(Nitrocellulose?membrane,NC?膜)置于鼠固定器前端端口處采樣20?min。將NC膜放于LB固體培養(yǎng)基上,于37°C下培12?h,觀察NC膜上是否有菌落生長(zhǎng)并計(jì)數(shù),評(píng)價(jià)暴露艙各端口是否均有氣溶膠達(dá),氣溶膠分布是否均勻。其他參數(shù)設(shè)置同2.2.2。??
小鼠體重變下降率均超過(guò)25%?(執(zhí)行仁慈終點(diǎn)),感染后11?d內(nèi)小鼠存活率為0%。??實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,小鼠暴露于甲型H1N1流感病毒氣溶膠下的時(shí)間可設(shè)置為多25?min。??(如圖2-3所示)??A?t????...t?U?2?4?6?*?10?12?M??????iiiui?<?mm?★?10?iiuii?I'?mui???20?imn?2?mm???<?min?★?10?iiiui?15?nim?令?20?mm??^?2'?nnn?S-?U)?mm?金?P?mui?^?r.?:3l?〇?uim?Q??〇?iuih?古luul?子中I??圖2-?3?H1N1氣溶膠暴露不同時(shí)間后小鼠體重變化率及存活率圖??Figure?2-?3?Weight?change?and?survival?rates?of?mice?for?different?times?post?exposure??注:A:?H1N1氣溶膠暴露不同時(shí)間后小鼠體重變化率圖(><0.05,…p<0.001/…p<0.0001);?B:??H1N1氣溶膠暴露不同時(shí)間后小鼠存活率圖(…p<0.001,""p<0.0001)。??Note.?A,?the?weight?change?of?H1N1?post-exposure?mice?for?different?times.?(*p<0.05,?***p<0.001,??…*p<0.0001).?B
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]動(dòng)物鼻式氣溶膠暴露裝置的運(yùn)行效果評(píng)價(jià)[J]. 郝新彥,向志光,高虹. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2018(09)
[2]動(dòng)物氣溶膠暴露裝置的特點(diǎn)及其應(yīng)用[J]. 郝新彥,張?jiān)?高虹. 中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備. 2018(01)
[3]微生物氣溶膠采集技術(shù)的特點(diǎn)及應(yīng)用[J]. 王彥杰,李琳,許光素,劉俊新,韓云平. 微生物學(xué)通報(bào). 2017(03)
[4]動(dòng)物氣溶膠吸入暴露裝置的研制[J]. 李勁松,楊文慧,何春雷,李娜,王潔,胡凌飛,李金忠,張珂. 中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備. 2016(09)
[5]MERS-CoV動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J]. 藍(lán)佳明,鄧瑤,譚文杰. 病毒學(xué)報(bào). 2016(03)
[6]不同劑量DPP4轉(zhuǎn)導(dǎo)后MERS-CoV感染小鼠模型的臨床及生物學(xué)特征比較[J]. 姚艷豐,藍(lán)佳明,李楓棣,牛培華,于品,盧帥,鮑琳琳,譚文杰,秦川. 病毒學(xué)報(bào). 2015(06)
[7]全身暴露動(dòng)態(tài)吸入染毒系統(tǒng)的建立與評(píng)價(jià)[J]. 聶志勇,隋昕,孫曉紅,王小平,王永安. 軍事醫(yī)學(xué). 2014(10)
[8]手機(jī)大腸菌群污染狀況調(diào)查及消毒方法研究[J]. 張濛,張廣偉,張秀麗. 環(huán)境衛(wèi)生學(xué)雜志. 2014(01)
[9]一種復(fù)方鄰苯二甲醛消毒劑對(duì)遺體表面消毒效果觀察[J]. 楊德慧,周雪媚,姜思朋,王永闊,劉國(guó)軍,李伯森,鐘照華,林樂(lè)勛,李玉光. 中國(guó)消毒學(xué)雜志. 2011(02)
[10]實(shí)驗(yàn)雪貂飼育籠的設(shè)計(jì)與應(yīng)用[J]. 和占龍,沈繼武,趙遠(yuǎn),魯帥堯,禹文海,王俊斌,陳麗雄. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2010(09)
博士論文
[1]MERS-CoV感染hDPP4轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立及免疫病理?yè)p傷機(jī)制研究[D]. 姜玉庭.軍事科學(xué)院 2018
本文編號(hào):3303013
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