研究背景:蚊蟲傳播的病毒性疾�。∕osquito-borne viral diseases,MBVDs）對(duì)全球公共衛(wèi)生構(gòu)成了嚴(yán)重威脅,嚴(yán)重危害人類生命健康,影響社會(huì)的穩(wěn)定。蚊蟲防制仍然是綜合蚊蟲管理（Integrate mosquito management,IMM）計(jì)劃中的核心干預(yù)策略,以減少M(fèi)BVDs的傳播。傳統(tǒng)的化學(xué)農(nóng)藥是目前使用最頻繁和最廣泛的控制蚊蟲的方法,然而,化學(xué)農(nóng)藥對(duì)生態(tài)系統(tǒng)造成了嚴(yán)重的負(fù)面影響,蚊蟲也出現(xiàn)了殺蟲劑抗性（Insecticide resistance,IR）問(wèn)題,這使得開(kāi)發(fā)新的蚊蟲防制方法至關(guān)重要。而生物殺蟲劑的研究與應(yīng)用將為蚊蟲的防制提供新的策略。生物防制主要應(yīng)用蚊蟲真菌,細(xì)菌、病毒等病原體、天敵等來(lái)達(dá)到防治效果,對(duì)非靶標(biāo)生物和有益生物無(wú)毒害,不危害生態(tài)系統(tǒng),蚊蟲對(duì)其不易產(chǎn)生抗性。蚊濃核病毒（Mosquitodensovirus,MDVs）屬于蚊蟲特異性病毒,特異性感染蚊類,可以在自然界中垂直傳播和水平傳播。高滴度病毒可以直接殺傷蚊類,低滴度可以影響蚊類壽命、產(chǎn)卵量、孵化率等,從而降低媒介種群數(shù)量。目前多種MDVs的全基因組己經(jīng)成功構(gòu)建為感染性克隆質(zhì)粒載... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－３．?ＡａｌＤＶ－７的基因組結(jié)構(gòu)??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３．?ＡａｌＤＶ－７?ｇｅｎｏｍｅ?ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ?

??結(jié)構(gòu)蛋白基因ＮＳ１和ＮＳ２和結(jié)構(gòu)蛋白基因ＶＰ的３＇ＲＡＣＥ?（圖１－４Ｃ）。如圖１－４Ｃ??所示，在ＶＰ３＇ＲＡＣＥ中僅檢測(cè)到明顯的條帶，經(jīng)過(guò)測(cè)序顯示多聚腺苷酸化開(kāi)始??于ＶＰ基因翻譯終止密碼子ＴＡＡ的下游６０ｎｔ。此外，ＮＳ１／ＮＳ２?３’ＲＡＣＥ可擴(kuò)??增出２５１１?ｂｐ的ＰＣＲ產(chǎn)物，經(jīng)測(cè)序分析，其與ＶＰ基因共有一個(gè)共同的ＴＴＳ。??由于ＮＳ１?／ＮＳ２和ＶＰ基因共有共同的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，理論上可從ＶＰ?５＇ＲＡＣＥ??獲得２，３３６?ｂｐ的產(chǎn)物，但是在實(shí)驗(yàn)中未能擴(kuò)増出相應(yīng)大小的條帶。因此，我們??通過(guò)ＲＴ－ＰＣＲ來(lái)確認(rèn)總ＲＮＡ中確實(shí)存在該完整轉(zhuǎn)錄本（引物ＲＴＦ和ＲＴＲ），??結(jié)果與預(yù)期一致（圖卜４Ｄ）。??Ａ?ＲＴｆ??４?ＶＰ＾ＮＰ?ＷＰＳ＇Ｐ?ＲＴＲ??１?ＮＳ２?；?ＮＳ１?Ｉ?Ｉ?ＶＰ??ＮＳ３＿Ｐ?ＮＳ３．ＮＰ?ＶＰ３．Ｐ?ＶＰ３．ＮＰ??ｍＲＮＡ??■?｜??Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｓｔａｒｔ?ｓｉｔｅ??Ｂ??５＇ＲＡＣＥ?Ｄ??ｊ?叮

１２?ｈ．ｐ．ｔ．后在ｐＶＰ－ＤｓＲｅｄ中的細(xì)胞中觀察到ＤｓＲｅｄ表達(dá)。在約４８?ｈ．ｐ．ｔ．后，??可以檢測(cè)到最大熒光強(qiáng)度�？梢杂^察到，ＮＳ１和ＮＳ２?ＤｓＲｅｄ融合表達(dá)蛋白均位??于Ｃ６／３６細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中，但主要位于細(xì)胞核中（圖１－７Ｂ）。三種蛋??白質(zhì)均勻分布在細(xì)胞核中（ｐＮＳｌ－ＤｓＲｅｄ和ｐＮＳ２－ＤｓＲｅｄ的上行圖片中），而ＮＳ１??和ＮＳ２在細(xì)胞核中也可呈現(xiàn)點(diǎn)灶狀分布（ｐＮＳｌ－ＤｓＲｅｄ和ｐＮＳ２－ＤｓＲｅｄ的下行圖??片中）。這些結(jié)果表明ＮＳｌ，?ＮＳ２和ＶＰ的ＮＬＳ確實(shí)發(fā)揮了核定位功能，將蛋??白質(zhì)從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核中。ＮＳ１和ＮＳ２在病毒ＤＮＡ復(fù)制過(guò)程中發(fā)揮作用，??而ＶＰ主要聚集到細(xì)胞核中用于病毒組裝。??Ａ?ｐＮＳｌ－ＤｓＲｅｄ?ｐＮＳ２－０ｓＲｅｄ??＼?ＩＲｓｌ?ＮＳ１?｜?ＮＳ２￣｜?ｉ?ＤｓＲｅｄ?ＴｌＲｓＮ?＜?ＩＲｓ｜?ＮＳ１?｜?ＮＳ２?ｊ?ＤｓＲｅｄ?！?ＩＲｓ＾＞??ｐＶＰ?ｐＶＰＮＬＳ－ＤｓＲｅｄ??，１?ｎ￣＼??ｖ?ＩＲｓ?ＮＳ１?ｌ?ＮＳ２?ＤｓＲｅｄ?｜ＪＲｓ〉??Ｂ??ＤＡＰ！?ＯｓＲｅｄ?Ｍｅｒｇｅ?ＤＡＰＩ?Ｏｓｆｉｅｄ?Ｍｅｒｇｅ??圖１－７．?ＡａｌＤＶ－７的ＮＳｌ，?ＮＳ２和ＶＰ蛋白的在Ｃ６／３６細(xì)胞的亞細(xì)胞定位??２４??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]蜚蠊防制中的高科技新生物技術(shù)——利用信息素誘引的蜚蠊病毒生物防制技術(shù)[J]. 岳木生,張令要.  中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志. 2001(04)



本文編號(hào)：3258010