為探討約氏瘧原蟲絲/蘇氨酸磷酸酶6（Plasmodium yoelii Protein Phosphatase 6, PyPP6）作為傳播阻斷疫苗候選抗原的可行性,采用PCR擴增PP6優(yōu)勢抗原表位并克隆入pET32a（+）載體,誘導(dǎo)PyPP6重組蛋白（rPyPP6）表達(dá)與純化,免疫小鼠獲取抗-PyPP6免疫血清（anti-PyPP6）。采用ELISA和Western Blot方法檢測anti-PyPP6血清效價和特異性,IFA檢測PyPP6蛋白在約氏瘧原蟲各期定位,體內(nèi)外實驗檢測anti-PyPP6血清對雄配子出絲、動合子形成和卵囊發(fā)育的影響。結(jié)果顯示,成功誘導(dǎo)rPyPP6表達(dá),anti-PyPP6血清抗體滴度為1:128000,PyPP6部分定位于約氏瘧原蟲質(zhì)膜。與對照組相比,anti-PyPP6免疫血清1∶5倍稀釋可顯著抑制61.5%配子體出絲,動合子數(shù)目和動合子轉(zhuǎn)化率分別降低了75%和19.7%,卵囊形成數(shù)量減少了35%。結(jié)果表明,PyPP6重組蛋白具有良好的免疫原性和抗原性,抗-PP6免疫血清具有顯著的傳播阻斷效果。 

【文章來源】：寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報. 2020,27(02)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

IFA 檢測PyPP6蛋白的亞細(xì)胞定位

與PBS組相比,抗-PyPP6免疫血清(1∶5)對配子體率及雌/雄配子體活化能力均無明顯影響(圖4-A和4-B)。但與對照組相比,抗-PyPP6血清處理組,雄配子出絲減少了61.5%(P< 0.05,圖4-C),雄配子粘附雌配子能力下降44.6%(P<0.0001,圖4-D),提示抗-PyPP6免疫血清可影響雄配子受精功能。2.5 抗-PyPP6免疫血清對體外動合子期原蟲發(fā)育的影響

從圖5-A可以看出,1∶5稀釋的抗-PyPP6免疫血清處理組(PyPP6)動合子的形成數(shù)量明顯減少了75%(P< 0.01),且動合子轉(zhuǎn)化率下降了19.7%(P< 0.01,圖5-B)。上述結(jié)果提示:抗-PyPP6免疫血清對體外動合子的形成及發(fā)育具有顯著的抑制作用。2.6 抗-PyPP6免疫血清對卵囊形成數(shù)量的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]伯氏瘧原蟲絲/蘇氨酸磷酸酶6抗血清對原蟲有性階段發(fā)育抑制作用的研究[J]. 孫林,洪明陽,曹雅明,朱曉彤,崔立旺.  中國免疫學(xué)雜志. 2019(10)
[2]中緬邊境流行區(qū)惡性瘧原蟲野生株馴化方式的研究[J]. 閆妍,韋煥蘋,洪明陽,朱曉彤,曹雅明.  寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報. 2018(04)



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