目的研究布魯氏菌IV型分泌系統(tǒng)效應蛋白BPE043在布魯氏菌感染和胞內(nèi)生存過程中的作用。方法以羊種布魯氏菌104株為起始菌株,通過同源重組的方法構建布魯氏菌BPE043基因缺失株。將布魯氏菌野生株104和突變株104ΔBPE043在相同的起始濃度下培養(yǎng),觀察它們生長變化的趨勢;用野生株和突變株分別感染小鼠,構建小鼠體內(nèi)感染模型,測定小鼠脾重并計算脾臟細菌載量;利用免疫共沉淀技術篩選BPE043蛋白的宿主互作蛋白。結(jié)果成功構建了布魯氏菌BPE043基因缺失株。與野生株相比,突變株104ΔBPE043在體外培養(yǎng)的生長趨勢和野生株基本相同;小鼠感染實驗顯示,在感染1周后,兩組小鼠脾均腫大,但突變株104ΔBPE043感染組小鼠脾重低于野生株104感染組小鼠脾重;在感染后兩周,兩組小鼠脾腫大現(xiàn)象開始減輕。在細菌載量方面,在感染1周后,突變株104ΔBPE043感染小鼠的脾臟細菌載量低于野生株104感染小鼠;在感染后2周,突變株感染組的脾細菌載量下降趨勢更明顯。免疫共沉淀實驗顯示BPE043蛋白與鼠源小分子GTP結(jié)合蛋白Rab4和Rab11存在相互作用。結(jié)論布魯氏菌IV型分泌系統(tǒng)效應蛋白BPE0... 

【文章來源】：中國人獸共患病學報. 2020,36(08)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

免疫共沉淀篩選BPE043互作蛋白

布魯氏菌野生株104和突變株104ΔBPE043小鼠體內(nèi)感染試驗中脾臟重量(A)和脾細菌載量(B)分析

PCR驗證B.melitensis ΔBPE043突變株結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3220257