酒精濫用不僅導致組織器官損傷,還易誘發(fā)神經(jīng)精神疾病。研究表明,DNA甲基化在酒精誘導基因表達和行為改變中發(fā)揮重要作用,但具體的神經(jīng)生物學機制尚未被闡明。為了探索DNA甲基化在酒精濫用中的作用機制,本研究選取健康成年雄性SD大鼠（Rattusnorvegicus）32只,隨機分為飲水對照組（n=16）和慢性酒精暴露組（n=16）,運用雙瓶選擇實驗（two bottle choice test, TBCT）評估大鼠酒精偏愛率（alcohol preference）,通過曠場行為（openfieldtest,OFT）評估活動狀態(tài)并檢測血酒精濃度。分離兩組大鼠內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)（medial prefrontalcortex,mPFC）,提取總DNA,利用簡化代表性重亞硫酸鹽測序技術(shù)（reducedrepresentationbisulfite sequencing, RRBS）構(gòu)建mPFC甲基化譜,對差異基因進行功能富集和通路分析,篩選與酒精濫用密切相關的甲基化差異基因,運用qRT-PCR技術(shù)檢測差異基因的表達,驗證DNA甲基化對基因的表達調(diào)控;利用qRT-PCR和Westernblot檢測甲基... 

【文章來源】：遺傳. 2020,42(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：14 頁

【部分圖文】：

RRBS測序結(jié)果

為了明確短期內(nèi)酒精暴露對甲基化調(diào)控酶的作用，讓大鼠自由飲酒7 d后，本研究檢測了mPFC內(nèi)DNMTs和MeCP2的蛋白和mRNA表達改變(圖6)。非配對t檢驗顯示，短期酒精暴露不影響DNMT1(蛋白:t=0.092,P=0.928;mRNA:t=0.440,P=0.670)、DNMT3A(蛋白:t=0.153,P=0.880;mRNA:t=0.209,P=0.739)、DNMT3B(蛋白:t=0.198,P=0.846;mRNA:t=0.182,P=0.859)和MeCP2(蛋白:t=0.060,P=0.953;mRNA:t=0.394,P=0.653)的表達。圖6 短期酒精暴露后大鼠mPFC內(nèi)DNMT1、DNMT3A、DNMT3B和MeCP2蛋白和mRNA表達改變

短期酒精暴露后大鼠mPFC內(nèi)DNMT1、DNMT3A、DNMT3B和MeCP2蛋白和mRNA表達改變

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]中樞單胺類神經(jīng)遞質(zhì)在酒精依賴中的分子作用機制[J]. 楊曉華,張華峰,賴江華.  遺傳. 2014(01)
[3]酒精依賴相關基因的遺傳多態(tài)性[J]. 賀艮峰,鐘樹榮,景強.  遺傳. 2008(04)



本文編號：3215104