目的研究血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）衰老的影響及其相關(guān)蛋白激酶B（PKB/Akt）、核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）表達的變化,闡明血管內(nèi)皮細胞衰老對診治動脈粥樣硬化的重要意義。方法制備血管緊張素ⅡRPMI 1640培養(yǎng)液（10-6mol/L）培養(yǎng)HUVECs,通過β-半乳糖苷酶（β-gal）染色、流式細胞儀檢測細胞衰老,Western blotting測定Akt、磷酸化Akt、NF-κB蛋白水平。結(jié)果 AngⅡ誘導(dǎo)組β-gal陽性細胞數(shù)與對照組相比為（80.10±6.81）%;流式細胞儀檢測細胞周期停滯于G0^G1證實細胞衰老;與對照組相比,16、32和48 h Akt磷酸化蛋白表達水平明顯增高（P<0.05）,Akt磷酸化水平于32 h達到最高峰（P<0.01）;磷酸化Akt表達呈持續(xù)增加時,NF-κB呈顯著上升趨勢。結(jié)論血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞的衰老可能與Akt/NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān)。 

【文章來源】：中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2013,23(32)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要儀器和試劑
    1.2 方法
        1.2.1 四甲基偶氮唑藍比色法測定HUVECs活性
        1.2.2 HUVECs培養(yǎng)及實驗分組
        1.2.3 衰老細胞鑒定
        1.2.4 細胞周期變化
        1.2.5 Western blotting檢測Akt、p-Akt蛋白水平
        1.2.6 Western-blotting檢測NF-κB蛋白水平
    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 細胞存活率
    2.2 細胞的形態(tài)學(xué)改變
    2.3 衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶 (β-gal) 染色
    2.4 細胞周期分析
    2.5 不同時點AngⅡ作用對Akt、p-Akt蛋白質(zhì)表達的影響
    2.6 不同時點AngⅡ作用對NF-κB蛋白表達的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]血管緊張素Ⅱ?qū)ρ軆?nèi)皮細胞凋亡及p38絲裂素活化蛋白激酶表達的影響[J]. 單海燕,劉姝,胡翠竹,李效麗,白小涓,陳香美.  中國動脈硬化雜志. 2011(01)



本文編號：3165748