目的研究全反式維甲酸（all-trans retinoic acid,ATRA）與VEGF聯(lián)合應(yīng)用對(duì)于小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（mouse embryonic fibroblasts,MEFs）定向成骨分化的影響。方法取NIH孕鼠（孕12～15 d）子宮內(nèi)的胎鼠,去掉頭、心、肝等器官后,采用胰蛋白酶消化貼壁法分離培養(yǎng)MEFs。利用HEK-293細(xì)胞采用反復(fù)凍融法擴(kuò)增重組腺病毒紅色熒光蛋白（recombinant adenovirus-red fluorescent protein,Ad-RFP）及Ad-VEGF。采用ALP染色和ALP定量檢測(cè)法檢測(cè)單獨(dú)ATRA或VEGF以及ATRA和VEGF聯(lián)合應(yīng)用培養(yǎng)MEFs第3、5天ALP活性變化。將第3～4代MEFs分為A、B、C、D 4組,分別加入DMSO+Ad-RFP、ATRA、Ad-VEGF、ATRA+Ad-VEGF。實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR）檢測(cè)第3、7天成骨相關(guān)標(biāo)志物ALP、Ⅰ型膠原、骨橋蛋白（osteopontin,OPN）、骨鈣素（osteocalc... 

【文章來源】：中國修復(fù)重建外科雜志. 2020,34(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁


本文編號(hào)：3156318