研究背景:帕金森病是臨床上較為常見的神經(jīng)退行性疾病。帕金森病的病因和發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜。其主要病理學(xué)特征是中腦黑質(zhì)區(qū)致密部多巴胺能神經(jīng)元的缺失和α-突觸核蛋白堆積造成路易小體沉積,大多認(rèn)為其與線粒體功能障礙、氧化損傷、神經(jīng)炎癥、細(xì)胞自噬障礙等有關(guān)。miRNA是高度保守的內(nèi)源性非編碼單鏈RNA,能夠在轉(zhuǎn)錄水平抑制靶基因的表達(dá),參與調(diào)節(jié)生長發(fā)育、炎癥、凋亡等機(jī)體內(nèi)幾乎所有的生理病理過程。研究表明,多種miRNA在神經(jīng)系統(tǒng)中表達(dá)豐富,其表達(dá)異常與帕金森病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),miR-124和miR-146a在神經(jīng)系統(tǒng)中高度表達(dá),在膠質(zhì)瘤、腦脊髓炎和缺血性腦損傷等神經(jīng)系統(tǒng)疾病中發(fā)揮著重要作用。但目前關(guān)于miR-124和miR-146a與帕金森病的相關(guān)性及其表達(dá)變化在帕金森病中的作用機(jī)制尚不清楚。第一部分miR-124和miR-146a在帕金森病小鼠模型及神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)目的:檢測miR-124和miR-146a在帕金森病模型小鼠中腦組織及神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)。方法:腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶（MPTP）構(gòu)建帕金森病模型小鼠。采用RT-PCR檢測注射后不同時(shí)間點(diǎn)小鼠中腦組織中m... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

MPTP帕金森病模型小鼠中腦組織中miR-124和miR-146a的表達(dá)水平（A和B：分別為miR-124,miR-146a及內(nèi)參U6進(jìn)行qRT-PCR的擴(kuò)增曲線和熔解曲線圖；C和D：分別為miR-124和miR-146a的相對(duì)表達(dá)量；*，與對(duì)照組相比，P<0.05；#，與0d組相比，P<0.05；△，與1d組相比，P<0.05.）

19圖 4.2 RNA 原位雜交檢測 MPTP 帕金森病小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元中 miR-124 和小膠質(zhì)細(xì)胞中 miR-146a 的表達(dá)情況4.3 miR-124 和 miR-146a 在體外細(xì)胞中的表達(dá)MPP+是 MPTP 轉(zhuǎn)化的具有毒性的活性成分，能夠誘導(dǎo) SH-SY5Y 細(xì)胞構(gòu)建帕金森病細(xì)胞模型。而 LPS 是強(qiáng)烈的致炎性物質(zhì)，能夠誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞激活病釋放炎癥因子，能夠誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞系 BV2 構(gòu)建神經(jīng)炎癥模型。進(jìn)一步探討體外 MPP+處理的 SH-SY5Y 細(xì)胞中 miR-124 和 LPS 處理的 BV2 細(xì)胞中 miR-14的表達(dá)情況。采用 qRT-PCR 檢測體外 MPP+處理的 SH-SY5Y 細(xì)胞中 miR-124 和LPS 處理的 BV2 細(xì)胞中 miR-146a 的表達(dá)，miR-124 和 miR-146a 的擴(kuò)增曲線和熔解曲線分別如圖 4.3 和 4.4 所示。分別以生理鹽水處理組作為對(duì)照組，以U6snRNA 作為內(nèi)參基因，對(duì)照組 miR-124 和 miR-146a 的表達(dá)水平均校正為 1各組細(xì)胞中 miR-124 和 miR-146a 的表達(dá)情況分別如圖 4.5 和圖 4.6 所示。結(jié)果

第一部分 miR-124 和 miR-146a 在 MPTP 帕金森病小鼠模型中的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，不同濃度 MPP+處理的 SH-SY5Y 細(xì)胞中 miR-124 的表達(dá)水平均顯著降低（P<0.05）；0.1mM 組中 miR-124 的表達(dá)水平為（0.764 0.045），而 5mM 組中 miR-124 的表達(dá)水平為(0.371 0.043)，miR-124 的表達(dá)水平隨著MPP+濃度的增加而降低，但 0.5mM 組、1mM 組和 5mM 組中 miR-124 的表達(dá)明顯低于對(duì)照組和 0.1mM 組，三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。而與對(duì)照組相比，不同濃度 LPS 處理的 BV2 細(xì)胞中 miR-146a 的表達(dá)水平升高，但 lμg/ml LPS處理組中 miR-146a 的表達(dá)為（1.130 0.052），與對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；而 100μg/ml LPS 處理組中 miR-146a 的表達(dá)為（2.107 0.048），明顯高于對(duì)照組和 lμg/ml LPS 處理組（P<0.05）。該結(jié)果表明，不同濃度的 MPP+處理后，SH-SY5Y 細(xì)胞中 miR-124 的表達(dá)明顯降低，而不同濃度的 LPS 處理后，BV2 細(xì)胞中 miR-146a 的表達(dá)升高，進(jìn)一步證實(shí)了體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3146117