【背景及目的】轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（Transferrin Receptor,TfR）屬于細胞膜Ⅱ型跨膜糖蛋白,與細胞鐵攝取有關(guān),影響細胞的生長和增殖。TfR在正常組織細胞中表達較低,而在腫瘤細胞表面表達增加,由于腫瘤細胞增長快速,需要合成更多DNA,核苷酸還原酶需要更多的輔因子鐵,從而迫使腫瘤細胞上調(diào)TfR的表達。文獻報道以及課題組前期研究證明,腫瘤細胞表面的TfR與轉(zhuǎn)鐵蛋白的親和力是正常細胞的10¹00倍。同時,TfR的表達水平與腫瘤的分期和預(yù)后息息相關(guān)。TfR以其胞外段結(jié)合特性、內(nèi)吞性和在人類腫瘤細胞病理學(xué)上的作用特點,作為腫瘤靶向顯像和治療的一個重要特異性標(biāo)志備受關(guān)注。然而在腫瘤的靶向生物治療中,如何獲得高效、特異、穩(wěn)定的抗體是有待解決的關(guān)鍵問題。本課題旨在前期構(gòu)建抗TfR scFv和雙價表達載體的基礎(chǔ)上,進一步設(shè)計與構(gòu)建新型抗TfR四價基因工程抗體（TfR-TeAb）,建立穩(wěn)定表達細胞株,探索優(yōu)化其真核表達與培養(yǎng)條件,以及探討四價抗體的生物學(xué)效應(yīng),為其聯(lián)合抗體依賴的效應(yīng)細胞,如NK細胞治療腫瘤研究奠定基礎(chǔ)�！緦嶒灧椒ā�1.基因擴增與表達載體的構(gòu)建以本課題組前期構(gòu)... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

表達質(zhì)粒TfR-(scFv)

r2-VL-linker(1/2)基因片段. 2 Variable region of light bp/1500bp/1000bp/700bp/5inker2-VL-linker(1/2)PCR-BamHI 基因片段：為模板，通過 PCR 擴增， VH、酶切位點、保護堿基顯示條帶（圖 3），PCR值相符。

er2-VL-linker(1/2)基因片段 ig. 2 Variable region of light c0bp/1500bp/1000bp/700bp/50-Linker2-VL-linker(1/2)PCR 產(chǎn)H-BamHI 基因片段：為模板，通過 PCR 擴增，p VH、酶切位點、保護堿基間顯示條帶（圖 3），PCR 產(chǎn)論值相符。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]腫瘤細胞鐵代謝及其調(diào)節(jié)研究進展[J]. 王淑君,高沖,陳寶安.  癌癥. 2010(04)
[2]Antigen-binding characteristics of AbCD71 and its inhibitory effect on PHA-induced lymphoproliferation[J]. Ping LEI~2,Yong HE~3,Qing YE~4,Hui-fen ZHU~2,Xiao-mei YUAN~2,Jing LIE~2,Wei XING~2,Sha WU~2,Wei DAI~2,Xin SHEN~2,Guo-bin WANG~(5,6),Guan-xin SHEN~(2,6)Departments of ~2 Immunology and Pharmacology,~3 Nuclear Medicine and ~5 Surgery,Union Hospital,Tongji Medical College,HuazhongUniversity of Science and Technology,Wuhan 430030,China;~4 Department of Pathobiology and Physiology,Medicine and Life ScienceCollege of Jianghan University,Wuhan 430056,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(10)
[3]轉(zhuǎn)鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的研究進展[J]. 張宏偉,劉俊濤,王曉航.  國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊. 2000(04)



本文編號：3137290