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Treg細胞中關鍵轉錄因子Foxp3相互作用蛋白的鑒定與分析

發(fā)布時間:2017-04-16 22:02

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【摘要】:目的鑒定Treg細胞中Foxp3相互作用蛋白。方法構建包含SBP和Protein G結合肽的Tags的Foxp3 knock-in轉基因小鼠,分選Treg細胞,用親和磁珠法純化Foxp3相互作用蛋白復合體,質譜測序鑒定復合體蛋白組分并進行蛋白質組學分析和蛋白相互作用的驗證。結果流式細胞分選的Treg純度超過90%;經過親和磁珠法純化和質譜分析顯示Foxp3有100個以上候選相互作用蛋白伙伴;免疫共沉淀方法初步鑒定部分伙伴蛋白間可相互結合。結論本研究在小鼠體內Treg細胞中初步獲得Foxp3候選相互作用蛋白并證實部分蛋白間可相互作用,為這些蛋白對Treg細胞的功能鑒定提供基礎。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學免疫研究所;
【關鍵詞】調節(jié)性T細胞 Foxp 親和磁珠純化 質譜分析 免疫共沉淀
【分類號】:R392
【正文快照】: CD4+CD25+調節(jié)性T細胞(regulatory T cells,Treg)是淋巴細胞的異源群體,主要調節(jié)自身免疫耐受和維護組織內穩(wěn)態(tài)[1]。2003年發(fā)現X染色體編碼的叉頭區(qū)域轉錄因子Foxp3能調控小鼠Tregs細胞的產生和功能;異常表達的Foxp3能夠誘導幼稚T細胞的調節(jié)功能,導致系列免疫相關性疾病,說明

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