Treg細(xì)胞中關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子Foxp3相互作用蛋白的鑒定與分析
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【摘要】:目的鑒定Treg細(xì)胞中Foxp3相互作用蛋白。方法構(gòu)建包含SBP和Protein G結(jié)合肽的Tags的Foxp3 knock-in轉(zhuǎn)基因小鼠,分選Treg細(xì)胞,用親和磁珠法純化Foxp3相互作用蛋白復(fù)合體,質(zhì)譜測(cè)序鑒定復(fù)合體蛋白組分并進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析和蛋白相互作用的驗(yàn)證。結(jié)果流式細(xì)胞分選的Treg純度超過(guò)90%;經(jīng)過(guò)親和磁珠法純化和質(zhì)譜分析顯示Foxp3有100個(gè)以上候選相互作用蛋白伙伴;免疫共沉淀方法初步鑒定部分伙伴蛋白間可相互結(jié)合。結(jié)論本研究在小鼠體內(nèi)Treg細(xì)胞中初步獲得Foxp3候選相互作用蛋白并證實(shí)部分蛋白間可相互作用,為這些蛋白對(duì)Treg細(xì)胞的功能鑒定提供基礎(chǔ)。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)免疫研究所;
【關(guān)鍵詞】: 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 Foxp 親和磁珠純化 質(zhì)譜分析 免疫共沉淀
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Treg)是淋巴細(xì)胞的異源群體,主要調(diào)節(jié)自身免疫耐受和維護(hù)組織內(nèi)穩(wěn)態(tài)[1]。2003年發(fā)現(xiàn)X染色體編碼的叉頭區(qū)域轉(zhuǎn)錄因子Foxp3能調(diào)控小鼠Tregs細(xì)胞的產(chǎn)生和功能;異常表達(dá)的Foxp3能夠誘導(dǎo)幼稚T細(xì)胞的調(diào)節(jié)功能,導(dǎo)致系列免疫相關(guān)性疾病,說(shuō)明
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本文編號(hào):311747
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