目的探討低氧暴露下小鼠生精小管病理損傷情況以及低氧對小鼠精母細(xì)胞（GC-2spd, GC-2）細(xì)胞凋亡的影響。方法 40只3周齡雄性Balb/c小鼠按照Excel Random函數(shù)隨機(jī)分為常氧組、低氧15、30、60 d組,低氧各組小鼠分別暴露于模擬海拔6 000 m低壓艙中減壓15、30、60 d,常氧組在平原（海拔300 m）喂養(yǎng),減壓結(jié)束后取睪丸組織,HE和TUNEL染色檢測睪丸生精小管的病理損傷;將體外培養(yǎng)的GC-2spd細(xì)胞,隨機(jī)分為低氧組和常氧組,低氧組細(xì)胞置1%氧和5%二氧化碳低氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48、60和72 h,常氧組置21%氧和5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48、60和72 h。采用流式細(xì)胞技術(shù)、TUNEL檢測法、培養(yǎng)液上清乳酸脫氫酶（lactic dehydrogenase, LDH）活性測定和培養(yǎng)液caspase-3/8/9活性測定等方法來檢測GC-2細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果低氧15、30、60 d組小鼠睪丸生精小管生精細(xì)胞凋亡率分別為（37.2±5.4）%、（66.3±6.4）%、（73.5±8.2）%,均顯著高于常氧組凋亡率（4.6±1.4）%,P<0.01,流式細(xì)... 

【文章來源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(06)北大核心

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模擬高原6 000 m低氧對小鼠睪丸生精小管病理損傷的影響

本課題組建立了1%O2暴露下的GC-2細(xì)胞凋亡模型,流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明,分別與21%O2暴露48、60、72 h組比較,1%O2氧暴露48、60、72 h組GC-2細(xì)胞凋亡率分別顯著升高,且差異具有顯著性(P<0.01),見圖2。激光共聚焦觀察發(fā)現(xiàn)(200×),分別與21%O2暴露48、60、72 h組比較,1%O2氧暴露48、60、72 h組凋亡GC-2細(xì)胞數(shù)/視野分別顯著增多,見圖3。2.3 低氧對GC-2細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的影響

細(xì)胞膜破壞是細(xì)胞凋亡起始環(huán)節(jié),細(xì)胞膜破壞后,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的酶特別是酶活性較為穩(wěn)定的乳酸脫氫酶(lactic acid dehydrogenase, LDH)釋放到培養(yǎng)液里,通過檢測從質(zhì)膜破裂的細(xì)胞中釋放到培養(yǎng)液中的LDH的活性,就可以實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞毒性的定量分析。結(jié)果表明,與21%O2暴露48 h組比較,1%O2暴露48 h組GC-2細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH值顯著升高且差異具有顯著性(P<0.01,圖4)。圖4 低氧對GC-2細(xì)胞LDH活性影響


本文編號：3069367