目的探討低氧暴露下小鼠生精小管病理?yè)p傷情況以及低氧對(duì)小鼠精母細(xì)胞（GC-2spd, GC-2）細(xì)胞凋亡的影響。方法 40只3周齡雄性Balb/c小鼠按照Excel Random函數(shù)隨機(jī)分為常氧組、低氧15、30、60 d組,低氧各組小鼠分別暴露于模擬海拔6 000 m低壓艙中減壓15、30、60 d,常氧組在平原（海拔300 m）喂養(yǎng),減壓結(jié)束后取睪丸組織,HE和TUNEL染色檢測(cè)睪丸生精小管的病理?yè)p傷;將體外培養(yǎng)的GC-2spd細(xì)胞,隨機(jī)分為低氧組和常氧組,低氧組細(xì)胞置1%氧和5%二氧化碳低氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48、60和72 h,常氧組置21%氧和5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48、60和72 h。采用流式細(xì)胞技術(shù)、TUNEL檢測(cè)法、培養(yǎng)液上清乳酸脫氫酶（lactic dehydrogenase, LDH）活性測(cè)定和培養(yǎng)液caspase-3/8/9活性測(cè)定等方法來(lái)檢測(cè)GC-2細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果低氧15、30、60 d組小鼠睪丸生精小管生精細(xì)胞凋亡率分別為（37.2±5.4）%、（66.3±6.4）%、（73.5±8.2）%,均顯著高于常氧組凋亡率（4.6±1.4）%,P<0.01,流式細(xì)... 

【文章來(lái)源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(06)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

模擬高原6 000 m低氧對(duì)小鼠睪丸生精小管病理?yè)p傷的影響

本課題組建立了1%O2暴露下的GC-2細(xì)胞凋亡模型,流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明,分別與21%O2暴露48、60、72 h組比較,1%O2氧暴露48、60、72 h組GC-2細(xì)胞凋亡率分別顯著升高,且差異具有顯著性(P<0.01),見(jiàn)圖2。激光共聚焦觀察發(fā)現(xiàn)(200×),分別與21%O2暴露48、60、72 h組比較,1%O2氧暴露48、60、72 h組凋亡GC-2細(xì)胞數(shù)/視野分別顯著增多,見(jiàn)圖3。2.3 低氧對(duì)GC-2細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的影響

細(xì)胞膜破壞是細(xì)胞凋亡起始環(huán)節(jié),細(xì)胞膜破壞后,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的酶特別是酶活性較為穩(wěn)定的乳酸脫氫酶(lactic acid dehydrogenase, LDH)釋放到培養(yǎng)液里,通過(guò)檢測(cè)從質(zhì)膜破裂的細(xì)胞中釋放到培養(yǎng)液中的LDH的活性,就可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞毒性的定量分析。結(jié)果表明,與21%O2暴露48 h組比較,1%O2暴露48 h組GC-2細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH值顯著升高且差異具有顯著性(P<0.01,圖4)。圖4 低氧對(duì)GC-2細(xì)胞LDH活性影響


本文編號(hào)：3069367