<正>原位雜交和免疫組化雙染技術(shù)是在不同層次來檢測同一細(xì)胞上某些物質(zhì)的表達(dá)是否有相關(guān)性的一種實(shí)驗(yàn)方法。由于操作步驟復(fù)雜,實(shí)驗(yàn)不易取得理想效果。我科結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況,經(jīng)過反復(fù)摸索,獲得滿意效果,現(xiàn)將我科經(jīng)驗(yàn)總結(jié)如下。1材料與方法1.1標(biāo)本來源收集廣東省人民醫(yī)院病理科2019年1～5月EBER陽性病例16例,其中NK/T淋巴瘤8例,Burkitt淋巴瘤2例,血管免疫母細(xì)胞性淋巴瘤4例,漿母細(xì)胞性淋巴瘤1例,淋巴結(jié)外周T細(xì)胞淋巴瘤1例。所有標(biāo)本均及時(shí)固定及規(guī)范化取材,經(jīng)10%中性福爾馬林固定。 

【文章來源】：臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2020,36(09)北大核心

【文章頁數(shù)】：2 頁

【部分圖文】：

EBER與CD3雙染，原位雜交和免疫組化雙染

圖1 EBER與CD3雙染，原位雜交和免疫組化雙染酶消化是原位雜交檢測成功與否的關(guān)鍵步驟。其目的是去除靶核酸周圍的蛋白質(zhì),增加組織的通透性,暴露靶基因,有利于探針滲透,增強(qiáng)雜交信號強(qiáng)度[5]。在單純性的EBER原位雜交檢測中,試劑盒推薦的酶消化時(shí)間為30 min,但作者發(fā)現(xiàn),在EBER原位雜交和免疫組化雙染實(shí)驗(yàn)中,如果先消化30 min后免疫組化再稍加修復(fù),免疫組化染色大部分沒信號或信號極弱,細(xì)胞結(jié)構(gòu)往往不完整,呈修復(fù)過度狀態(tài);如果免疫組化不修復(fù),細(xì)胞結(jié)構(gòu)比較完好,但免疫組化染色太弱或沒信號,達(dá)不到染色要求。經(jīng)過反復(fù)摸索,作者首先就不同的酶消化時(shí)間對EBER原位雜交結(jié)果的影響進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)酶消化12、16、20 min,EBER原位雜交染色信號均夠強(qiáng),背景干凈,達(dá)到染色要求。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]EB病毒感染實(shí)驗(yàn)室診斷及臨床應(yīng)用專家共識[J]. 謝正德,劉春艷,艾軍紅.  中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2018 (01)
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