近年來(lái),單細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的相關(guān)研究引起了科學(xué)家們的廣泛關(guān)注。單個(gè)細(xì)胞分離相關(guān)的技術(shù)、單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)手段的迅速發(fā)展,尤其為精準(zhǔn)、可靠解析造血細(xì)胞的異質(zhì)性提供了強(qiáng)有力的生物學(xué)手段。造血干細(xì)胞作為一類研究最為深入的組織特異性干細(xì)胞,可產(chǎn)生所有成熟的血細(xì)胞類型,且具有自我更新能力。對(duì)于這群具有高度異質(zhì)性的群體,單細(xì)胞水平的研究不可或缺。本研究團(tuán)隊(duì)新近發(fā)展了單細(xì)胞Index sorting技術(shù),并運(yùn)用該流式技術(shù)研究了小鼠胚胎生血內(nèi)皮細(xì)胞。前期積累的大量造血干細(xì)胞（Hematopoietic Stem Cell,HSC）發(fā)育全程的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù),為進(jìn)一步發(fā)掘并富集出生血內(nèi)皮群體提供了重要的線索。前期研究發(fā)現(xiàn)表面分子CD47表達(dá)在部分AGM區(qū)血管內(nèi)皮細(xì)胞以及所有pre-HSC（造血干細(xì)胞前體）上,分別通過(guò)富集CD47-、CD47+的內(nèi)皮細(xì)胞和pre-HSC,經(jīng)過(guò)體外誘導(dǎo)孵育結(jié)合小鼠移植實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),具有造血干細(xì)胞活性的細(xì)胞均富集在CD47+細(xì)胞群體中,提示CD47可進(jìn)一步用作標(biāo)記發(fā)育階段更早的造血干細(xì)胞相關(guān)群體。本研究中,應(yīng)用流式細(xì)胞Index Sorting技術(shù)的可回溯性功能,即在上述分選群體標(biāo)... 

【文章來(lái)源】：軍事科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一章 單細(xì)胞分選技術(shù)的建立
    1.1 單細(xì)胞分選裝置
        1.1.1 BD FACSAriaⅡ開(kāi)機(jī)程序
        1.1.2 質(zhì)控操作
        1.1.3 單細(xì)胞分選樣品制備
        1.1.4 噴嘴的選取
        1.1.5 液流的監(jiān)視
        1.1.6 手動(dòng)調(diào)節(jié)液滴延遲
        1.1.7 分選角度調(diào)整
    1.2 分選
        1.2.1 分選前調(diào)試
        1.2.2 分選后細(xì)胞純度的檢測(cè)
        1.2.3 微孔板分選
        1.2.4 index sorting分選
第二章 單細(xì)胞分選技術(shù)精確鑒定生血內(nèi)皮細(xì)胞群體
    2.1 材料方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 單細(xì)胞Index Sorting原理及使用
+內(nèi)皮細(xì)胞具有生血潛能">        2.2.2 KIT⁺內(nèi)皮細(xì)胞具有生血潛能
        2.2.3 表面分子CD47顯著富集生血內(nèi)皮細(xì)胞
    2.3 討論
第三章 單細(xì)胞分選小鼠骨髓造血干細(xì)胞及功能驗(yàn)證
    3.1 材料與方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 小鼠骨髓造血干細(xì)胞單細(xì)胞直接移植方法的建立
        3.2.2 小鼠骨髓單細(xì)胞移植五系檢測(cè)
        3.2.3 小鼠骨髓造血干細(xì)胞單細(xì)胞移植后體內(nèi)重建分析
    3.3 小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論著
作者在學(xué)期間取得的學(xué)術(shù)成果
主要簡(jiǎn)歷
致謝
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]全基因組擴(kuò)增技術(shù)原理及研究進(jìn)展[J]. 潘孝明,梁興國(guó).  生物技術(shù)通報(bào). 2014(12)
[2]單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組高通量測(cè)序分析新進(jìn)展[J]. 文路,湯富酬.  遺傳. 2014(11)
[3]下一代測(cè)序技術(shù)在表觀遺傳學(xué)研究中的重要應(yīng)用及進(jìn)展[J]. 沈圣,屈彥純,張軍.  遺傳. 2014(03)
[4]單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組研究進(jìn)展[J]. 周超平,李鑫輝.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2013(12)
[5]轉(zhuǎn)錄組研究新技術(shù):RNA-Seq及其應(yīng)用[J]. 祁云霞,劉永斌,榮威恒.  遺傳. 2011(11)



本文編號(hào)：3043102