目的探討nanos1基因在日本血吸蟲的定位以及不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)情況。方法在NCBI上搜索日本血吸蟲nanos1基因,PCR擴(kuò)增、測序并將其全長序列經(jīng)BLAST軟件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9進(jìn)行多重序列比對(duì),利用MAGA 5.05構(gòu)建進(jìn)化樹進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析。體外轉(zhuǎn)錄地高辛（DIG）標(biāo)記的RNA探針,并將其用于日本血吸蟲感染后第18、24和42天3個(gè)發(fā)育時(shí)期的雌雄蟲整體原位雜交,以確定nanos1基因在日本血吸蟲的定位。結(jié)果 PCR擴(kuò)增獲得日本血吸蟲nanos1基因,生物信息學(xué)分析結(jié)果表明其編碼的蛋白與曼氏血吸蟲nanos2蛋白同源性最高。體外轉(zhuǎn)錄成功的RNA探針用于日本血吸蟲整體原位雜交,在感染后第24、42天雌蟲的卵巢和卵黃腺以及18天雌蟲的卵巢檢測到陽性雜交信號(hào),而各個(gè)發(fā)育階段的雄蟲均未觀察到明顯陽性雜交信號(hào)。結(jié)論日本血吸蟲nanos1基因高表達(dá)于感染后第18天雌蟲的卵巢以及第24、42天雌蟲的卵巢和卵黃腺。該研究初步揭示了日本血吸蟲nanos1基因的表達(dá)模式,為研究nanos1基因的功能提供了重要線索。 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,55(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

圖1 日本血吸蟲nanos1氨基酸序列與其他物種的nanos同源物氨基酸序列多重比對(duì)

基于不同物種nanos蛋白序列構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹

PCR產(chǎn)物及重組質(zhì)粒雙酶切鑒定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Nanos3與生殖細(xì)胞發(fā)育分化[J]. 于萌,廉智敏,華進(jìn)聯(lián).  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2012(04)



本文編號(hào)：3038039