目的:構(gòu)建獲得HPV31構(gòu)象依賴的中和單抗。方法:采用昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)的HPV31 L1VLP（virus-like particle, VLP）免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞融合,收集雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清,首先采用HPV31 VLP-ELISA及HPV31假病毒中和實(shí)驗(yàn)篩選分泌HPV31中和單抗的雜交瘤細(xì)胞株,然后純化單克隆抗體,分別采用假病毒中和實(shí)驗(yàn)及ELISA實(shí)驗(yàn)對(duì)純化后單克隆抗體進(jìn)行鑒定,包括抗體的亞型及其結(jié)合表位的構(gòu)象特征、針對(duì)HPV31的中和IC50及針對(duì)HPV16、HPV18、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58、HPV6、HPV11的交叉中和活性。結(jié)果:篩選獲得9株HPV31構(gòu)象依賴中和單抗,其中3株HPV31特異性中和單抗中有2株的IC50<10 ng/mL,分別是XM31-13（0.36,Ig G1）及XM31-23（7.10,Ig G1）,6株交叉中和單抗中亦有2株的IC50<10ng/mL,分別是XM31-19（7.14,Ig G1）、XM31-20（6.91,Ig G1）。結(jié)論:獲得的9株HPV31構(gòu)象依賴的中和單抗,特別... 

【文章來(lái)源】：現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2020,20(06)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
前言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 雜交瘤細(xì)胞株的建立
    1.3 雜交瘤單克隆細(xì)胞的篩選
        1.3.1 HPV31VLP-ELISA的篩選
        1.3.2 HPV31中和單抗的篩選及純化
    1.4 單抗抗體亞型鑒定
    1.5 單抗的中和活性及交叉中和活性檢測(cè)
    1.6 HPV31中和單抗結(jié)合活性的鑒定
2 結(jié)果
    2.1 單克隆細(xì)胞的篩選
    2.2 單抗的純化及鑒定
    2.3 單抗亞型及中和活性檢測(cè)
    2.4 HPV31中和單抗結(jié)合活性檢測(cè)
3 討論



本文編號(hào)：3037390