研究目的:代謝綜合征（Metabolic syndrome,MS）,是由于能量利用和儲存紊亂所導致的一系列復雜癥候群,增加了非酒精性脂肪肝病（non-alcoholic fatty liver diseases,NAFLD）、糖尿病及心腦血管病等多種疾病的患病風險。其中,2型糖尿�。═ype 2 Diabetes,T2DM）的主要臨床表現(xiàn)為因胰島素缺乏或敏感性降低所導致的體內(nèi)高血糖,而肝臟糖異生的過度激活,則是T2DM的一個顯著特征。大量研究表明,O-GlcNAc糖基化修飾（O-GlcNAcylation,O-GlcNAc）可作為營養(yǎng)感受器參與多種代謝過程,尤其和糖代謝異常的關(guān)系極為密切。前期已證實,叉頭框轉(zhuǎn)錄因子（Forkhead box protein O1,FoxO1）作為糖異生關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,受到O-GlcNAc糖基轉(zhuǎn)移酶（O-GlcNAc transferase,OGT）的調(diào)控。但是,由OGA所介導的O-GlcNAc去糖基化對FoxO1的作用和分子機制尚待研究證實。研究方法:在表型研究方面,利用慢病毒感染方法,構(gòu)建人正常肝細胞OGA過表達和敲減的細胞系模型,并通過qPCR和We... 

【文章來源】：西北大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

慢病毒載體GV341結(jié)構(gòu)示意圖

OGA 過表達和敲減細胞系中 OGA 的 mRNA 表達水平。水平驗證蛋白，通過 Western blot 實驗得到驗證結(jié)果，如圖：條帶 1；OE-Vector：條帶 3）相比，OGA 敲減組（表達組（條帶 4）蛋白量顯著增多且明顯可觀察到條A 作為 O-糖基化水解酶，可解除目的蛋白的 O-糖基其總 O-糖基化水平和理論變化一致；而糖基轉(zhuǎn)移酶勢和 OGA 的一致，呈代償性同向變化；上述結(jié)果證和敲減。Sh-SOE-OE

西北大學碩士學位論文處理部分。結(jié)果 抑制肝糖異生過程關(guān)鍵酶表達究 OGA 調(diào)控肝臟糖異生的分子機制，本課題首先在體外人肝細胞（L減模型中驗證 OGA 對肝糖異生的調(diào)控作用，主要檢測了關(guān)鍵酶 G轉(zhuǎn)錄水平，qPCR 結(jié)果見圖 4，OGA 敲減后，G6Pase 和 PEPCK 的 m 2-3 倍，而過表達 OGA 則顯著抑制了這兩個基因的表達，且結(jié)果 < 0.05,**p < 0.01，***p < 0.001），提示該體外細胞模型可用于下一步的機


本文編號：3033245