發(fā)布時間：2021-02-09 21:41

　　目的:通過小鼠成肌細(xì)胞分化過程中添加PPARδ特異性激動劑GW0742和拮抗劑GSK0660的方法,研究小鼠成肌細(xì)胞分化過程中肌球蛋白重鏈（MHC）亞型的表達(dá)水平,進(jìn)一步探討PPARδ在成肌細(xì)胞分化過程中對肌纖維類型的影響。方法:培養(yǎng)C2C12成肌細(xì)胞株和新生昆明小鼠原代成肌細(xì)胞。各自分為三組,分別為對照組（DMSO組）、PPARδ激動劑組（GW0742組）、PPARδ拮抗劑組（GW0742+GSK0660組）。培養(yǎng)各組細(xì)胞至90%左右匯合度時,C2C12細(xì)胞株換生長培養(yǎng)基（DMEM培養(yǎng)基+10%FBS）為分化培養(yǎng)基（DMEM培養(yǎng)基+2%HS）,小鼠原代成肌細(xì)胞換生長培養(yǎng)基（F10培養(yǎng)基+20%FBS+5ng/ml鼠bFGF）為分化培養(yǎng)基（DMEM培養(yǎng)基+2%HS）;分別在C2C12成肌細(xì)胞株分化培養(yǎng)基培養(yǎng)的第4、8、12天和昆明小鼠原代成肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基培養(yǎng)的第2、4、6天收取細(xì)胞樣品;MHC免疫熒光鑒定成肌細(xì)胞分化情況;q-RT-PCR檢測MHC各亞型和PPARδ表達(dá)情況。結(jié)果:（1）C2C12成肌細(xì)胞分化第4天,MHC免疫熒光可見有肌管形成,三組細(xì)胞分化形成的肌管數(shù)量大致相當(dāng);分... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
Abstract
前言
1.材料與方法
    1.1 細(xì)胞株與動物及來源
    1.2 試劑
    1.3 q-RT-PCR引物
    1.4 實驗用儀器
    1.5 試劑配制方法
    1.6 實驗方法
        1.6.1 PPARδ在C2C12成肌細(xì)胞分化過程中對肌纖維亞型的影響
        1.6.2 小鼠原代成肌細(xì)胞的提取、純化和鑒定
        1.6.3 PPARδ在原代成肌細(xì)胞分化過程中對肌纖維亞型的影響
    1.7 統(tǒng)計方法
2.結(jié)果
    2.1 PPARδ在C2C12成肌細(xì)胞分化過程中對肌纖維亞型的影響
        2.1.1 各組C2C12成肌細(xì)胞在4、8、12天的生長分化情況
        2.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)不同時期MHC免疫熒光結(jié)果
        2.1.3 q-RT-PCR檢測各肌纖維亞型在不同時期的表達(dá)結(jié)果
    2.2 小鼠原代成肌細(xì)胞的鑒定
    2.3 PPARδ在小鼠原代成肌細(xì)胞分化過程中對肌纖維亞型的影響
        2.3.1 各組原代成肌細(xì)胞在2、4、6天的生長分化情況
        2.3.2 原代成肌細(xì)胞MHC免疫熒光染色結(jié)果
        2.3.3 q-RT-PCR檢測原代成肌細(xì)胞各肌纖維亞型表達(dá)結(jié)果
3.討論
4.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 PPARδ在相關(guān)疾病中作用的最新研究
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肌纖維類型轉(zhuǎn)化的分子信號通路及其營養(yǎng)調(diào)控進(jìn)展[J]. 郭秋平,文超越,王文龍,段葉輝,李穎慧,李鳳娜.  動物營養(yǎng)學(xué)報. 2017(06)
[2]小鼠原代成肌細(xì)胞分離、純化及培養(yǎng)[J]. 熊雷,何衍佶,戴威,趙圓,高彥飛,鄧忠良,聶茂.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2017(03)
[3]PGC-1α對有氧運動誘導(dǎo)增齡性大鼠骨骼肌纖維轉(zhuǎn)化的調(diào)控作用與機理[J]. 陳飛渡,熊萍,湯長發(fā),劉文鋒,朱文.  武漢體育學(xué)院學(xué)報. 2016(06)
[4]大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的原代培養(yǎng)鑒定和體外分化特點[J]. 馮永強,李崢,褚萬立,郁永輝,馬麗,柴家科.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2016 (12)
[5]低頻電刺激對低氧高二氧化碳大鼠比目魚肌肌纖維類型的影響[J]. 黃世園,蔣賢遜,沈潔,王小同.  溫州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(03)
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[7]Six1對骨骼肌發(fā)育和肌纖維類型轉(zhuǎn)化的調(diào)控[J]. 徐孟,陳小玲,陳代文,余冰,羅鈞秋,何軍,毛湘冰,虞潔,鄭萍,黃志清.  動物營養(yǎng)學(xué)報. 2015(07)
[8]神經(jīng)因素對缺血肢體血管生成和骨骼肌肌纖維重塑的影響[J]. 刁永鵬,郭李龍,連利珊,閆盛,陳厚早,李擁軍.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2015 (08)
[9]神經(jīng)生長因子基因轉(zhuǎn)染對缺血肢體血管生成和骨骼肌纖維重塑的影響[J]. 刁永鵬,郭李龍,連利珊,閆盛,陳厚早,李擁軍.  中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志. 2015(02)
[10]牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離鑒定和誘導(dǎo)分化[J]. 王軼敏,代陽,劉新峰,劉中偉,李吉霞,郭宏,丁向彬.  中國畜牧獸醫(yī). 2014(07)

博士論文
[1]二氫楊梅素調(diào)控FLCN-FNIP1/AMPK通路抑制肥胖誘導(dǎo)的骨骼肌纖維類型轉(zhuǎn)換[D]. 周啟程.第三軍醫(yī)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]低強度脈沖超聲波對培養(yǎng)小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞增殖分化的影響[D]. 段青.第三軍醫(yī)大學(xué) 2013



本文編號：3026278