發(fā)布時間：2021-01-25 20:42

　　目的分析H5N1流感病毒疫苗株（NIBRG-14）在MDCK-G1細胞上的遺傳穩(wěn)定性。方法將H5N1種子毒株在MDCK-G1細胞上傳代,收獲病毒液作為P2病毒,繼續(xù)傳至P15,每隔5代[即P1（原代）、P5、P10、P15]進行測序。分別以含不同濃度（1、2、4μg/mL）TPCK-trypsin的培養(yǎng)基及不同病毒接種MOI（1、0. 1、0. 01、0. 001、0. 000 1、0. 000 01）在MDCK-G1細胞上培養(yǎng)P1 H5N1病毒,檢測血凝滴度,計算CCID50,確定最適MOI及TPCK-trypsin濃度。將P1和P15 H5N1病毒接種雞胚,收獲尿囊液,經(jīng)Sepharose 4 Fast Flow凝膠柱層析法純化病毒后,進行電鏡觀察;采用培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法（DNA染色法）檢測支原體。結(jié)果 H5N1流感病毒疫苗株（NIBRG-14）在MDCKG1細胞傳代過程中血凝滴度增加,從1∶128升至1∶1 024,P1、P5、P10和P15 H5N1種子病毒8條基因序列（PB1、PB2、PA、HA、NP、NA、M、NS）經(jīng)DNAMAN比對結(jié)果一致。H5N1種子病毒株在MDC... 

【文章來源】：中國生物制品學(xué)雜志. 2020,33(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

不同TPCK-trypsin濃度下CCID50變化曲線

P1、P5、P10、P15 H5N1流感病毒種子病毒8條基因片段對比

不同MOI接種H5N1流感病毒時血凝滴度變化曲線

【參考文獻】：
期刊論文
[1]流感病毒在MDCK細胞上培養(yǎng)條件的優(yōu)化分析[J]. 周大宇,李春,趙曉輝,孫佩龍,張旭,毛玲玲.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2015(18)



本文編號：2999863