活血消癭片對缺碘性甲狀腺腫模型大鼠影響的實(shí)驗(yàn)性研究
本文關(guān)鍵詞:活血消癭片對缺碘性甲狀腺腫模型大鼠影響的實(shí)驗(yàn)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:初步探究缺碘性甲狀腺腫實(shí)驗(yàn)動物模型的制備;觀察活血消癭片對缺碘性甲狀腺腫模型大鼠甲狀腺功能和重量的影響;檢測實(shí)驗(yàn)大鼠相關(guān)細(xì)胞因子的水平,從血管生成和細(xì)胞凋亡的角度探討甲狀腺腫的發(fā)病機(jī)制及活血消癭片的治療影響機(jī)制;為證實(shí)活血消癭片在治療甲狀腺腫上的確切療效提供相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),進(jìn)一步推廣其在臨床上的應(yīng)用。方法:1.缺碘性甲狀腺腫大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷闹谱鱾浞?選用4周齡的健康SPF級Wistar大鼠共100只,體重約90-110g,雌鼠和雄鼠各占一半,按照隨機(jī)的方式分成五組,即正常組、模型對照組、活血消癭片組、L-T4組以及聯(lián)合組(活血消癭片加L-T4),每組各有20只,參考相關(guān)文獻(xiàn)關(guān)于缺碘性甲狀腺腫大鼠模型的造模方法[1,2],并結(jié)合預(yù)實(shí)驗(yàn)中的相關(guān)造模結(jié)果,對5組大鼠進(jìn)行造模處理,其中正常組予普通大鼠飲食和雙蒸餾水飼養(yǎng),剩余四組大鼠均采用由缺碘地區(qū)所產(chǎn)的糧食作物加工配制成的低碘飼料進(jìn)行喂養(yǎng),并飲用去離子水,碘含量為30-40μg/kg,喂養(yǎng)3個(gè)月。2.給藥:為排除喂養(yǎng)過程中食物水源中含碘造成的干擾因素,在實(shí)驗(yàn)結(jié)束前,正常組繼續(xù)喂以普通大鼠飲食及雙蒸餾水,其余各組大鼠繼續(xù)以低碘飼料和去離子水進(jìn)行喂養(yǎng),其中正常組和模型組作為對照不給予藥物治療,活血消癭片組予活血消癭片粉劑10mg/g.d,L-T4組予L-T4水溶液0.2ug/kg.d,聯(lián)合組予活血消癭片粉劑5mg/g.d和L-T4水溶液0.1ug/kg.d,治療過程為3個(gè)月,最后1次給藥前1天禁食,飲水不變。3.標(biāo)本的采集及數(shù)據(jù)記錄(血液標(biāo)本及甲狀腺組織稱重):最后一次給藥1小時(shí)后,各組大鼠2%利多卡因0.2ml/100g腹腔麻醉后,通過腹主動脈采血的方式,每只大鼠各收集4管,每管3-5ml,滴入5ml eppendorf管中,并作好標(biāo)記,放置于3000r/min離心機(jī)上離心10分鐘后,分離血清,將EP管平穩(wěn)放到零下20℃冰箱中以備檢測。鈍性分離實(shí)驗(yàn)大鼠的甲狀腺組織,用濾紙吸干甲狀腺組織中的液體,放置精密電子天平中稱量,記錄數(shù)據(jù),后人道處死大鼠。4.放免法檢測甲狀腺功能:包括游離三碘甲腺原氨酸(ft3)、游離甲狀腺素(ft4)、促甲狀腺激素(tsh),由湖北省中醫(yī)院花園山院區(qū)核醫(yī)學(xué)科負(fù)責(zé)檢測;5.雙抗體夾心酶聯(lián)免疫分析法(elisa)檢測大鼠血清vegf水平;6雙抗體夾心酶聯(lián)免疫分析法(elisa)檢測大鼠血清sfas、sfasl水平;7.觀察指標(biāo):比較治療后治療組與對照組甲狀腺質(zhì)量的差異、血清ft3、ft4、tsh差異以及血清vegf、sfas、sfasl的差異。結(jié)果:1.甲狀腺組織重量的結(jié)果表示:與正常組對照,模型對照組中大鼠的甲狀腺重量顯著上升(p0.01),從而說明通過控制大鼠每日的碘攝入量來制備缺碘性甲狀腺腫大鼠模型的方法是可行的,本次動物模型的制備成功;l-t4組和活血消癭片組中的甲狀腺重量與模型組對比呈下降趨勢,但無明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組對照,聯(lián)合組的甲狀腺重量明顯下降(p0.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明聯(lián)合用活血消癭片和l-t4治療缺碘性甲狀腺腫的效果要優(yōu)于兩藥單用。2.甲狀腺功能的結(jié)果表示:與正常組比較,模型組大鼠ft3、ft4均下降,tsh上升(p0.01),呈現(xiàn)甲減的狀態(tài);與模型組相比,活血消癭片組中甲狀腺功能的變化不明顯,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組相比,l-t4組及聯(lián)合組ft3、ft4上升,tsh顯著下降(p0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.大鼠血清vegf濃度的檢測結(jié)果顯示:與正常組比較,模型組大鼠血清vegf的濃度明顯上升(p0.01);與模型組比較,用藥組大鼠的血清vegf濃度均有下降(p0.01);與優(yōu)甲樂組比較,活血消癭片組及聯(lián)合用藥組大鼠血清vegf濃度無顯著差異(p0.05)。結(jié)果表明,優(yōu)甲樂與活血消癭片均可以通過適度下調(diào)血清vegf水平,而聯(lián)合用藥下降的幅度更為明顯。4.大鼠血清sfas、sfasl濃度的檢測結(jié)果顯示:與模型組比較,聯(lián)合用藥組大鼠血清sfas濃度明顯下降(p0.01),而優(yōu)甲樂組及活血消癭片組有所下降,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);與模型組比較,聯(lián)合用藥組大鼠血清sfasl濃度明顯上升(p0.01),其高于優(yōu)甲樂組及活血消炎片組(p0.05),亦高于正常組(p0.05),與模型組比較,優(yōu)甲樂組及活血消癭片組大鼠血清sfasl濃度亦均有所上升(p0.05)。結(jié)論:1.活血消癭片有抗甲狀腺腫大的作用,相對于l-t4來說,對于甲狀腺功能的影響較小,說明活血消癭片不良反應(yīng)少,安全性更高。2.血管內(nèi)皮生長因子vegf在甲狀腺腫的發(fā)病過程中以及治療的轉(zhuǎn)歸發(fā)揮著重要的意義,而活血消癭片抑制甲狀腺組織增生肥大的機(jī)制可能是通過下調(diào)血清vegf的濃度來達(dá)到的。3.凋亡因子(sfas、sfasl)與甲狀腺腫的發(fā)病進(jìn)展以及治療轉(zhuǎn)歸有著密切關(guān)聯(lián),活血消癭片能夠通過降低血清sfas濃度,升高血清sfasl的濃度,刺激甲狀腺細(xì)胞凋亡的活躍,從而實(shí)現(xiàn)抑制甲狀腺腫甚至縮小腫大甲狀腺組織的目的。
【關(guān)鍵詞】:活血消癭片 缺碘性甲狀腺腫 細(xì)胞因子 動物實(shí)驗(yàn)
【學(xué)位授予單位】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R285.5;R-332
【目錄】:
- 摘要5-8
- Abstract8-12
- 中英文縮略詞表12-13
- 前言13-17
- 第一部分 活血消癭片對缺碘性甲狀腺腫大鼠模型甲狀腺功能及重量的影響17-22
- 1.材料和試劑17
- 1.1 藥物試劑17
- 1.2 試劑耗材17
- 2.儀器設(shè)備17
- 3.實(shí)驗(yàn)方法17-18
- 3.1 實(shí)驗(yàn)動物17-18
- 3.2 模型制備及分組18
- 3.3 治療給藥18
- 3.4 標(biāo)本采集及甲狀腺剝離18
- 3.5 分析統(tǒng)計(jì)18
- 4.結(jié)果18-19
- 5 討論19-22
- 第二部分 活血消癭片對缺碘性甲狀腺腫模型大鼠生長因子VEGF的影響22-27
- 1.材料試劑22
- 1.1 藥物試劑22
- 1.2 試劑耗材22
- 2 儀器設(shè)備22
- 3 實(shí)驗(yàn)方法22-24
- 3.1 實(shí)驗(yàn)動物22
- 3.2 模型制備及分組22-23
- 3.3 治療給藥23
- 3.4 血液標(biāo)本采集23
- 3.5 VEGF-ELISA試驗(yàn)方法23-24
- 3.6 分析統(tǒng)計(jì)24
- 4 結(jié)果24-25
- 5 討論25-27
- 第三部分 活血消痰方對結(jié)甲患者凋亡因子(sFas、sFasL)的影響27-34
- 1.材料和試劑27
- 1.1 藥物試劑27
- 1.2 試劑耗材27
- 2 儀器設(shè)備27
- 3 實(shí)驗(yàn)方法27-30
- 3.1 實(shí)驗(yàn)動物27
- 3.2 模型制備及分組27-28
- 3.3 治療給藥28
- 3.4 血液標(biāo)本采集28
- 3.5 sFas-ELISA試驗(yàn)方法28-29
- 3.6 sFasL-ELISA試驗(yàn)方法29-30
- 3.7 分析統(tǒng)計(jì)30
- 4 結(jié)果30-31
- 5 討論31-34
- 討論34-41
- 結(jié)語41-42
- 參考文獻(xiàn)42-47
- 附錄-文獻(xiàn)綜述47-56
- 參考文獻(xiàn)54-56
- 致謝56
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:活血消癭片對缺碘性甲狀腺腫模型大鼠影響的實(shí)驗(yàn)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:298417
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