【目的】克隆中華按蚊（Anopheles sinensis）羧酸酯酶基因AsBe3,并對(duì)該基因進(jìn)行生物信息學(xué)和分子對(duì)接分析�！痉椒ā靠寺sBe3基因編碼序列,并在AsBe3蛋白的理化性質(zhì)、系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系、二級(jí)結(jié)構(gòu)、多重序列比對(duì)、系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系等方面對(duì)進(jìn)行了預(yù)測(cè)和分析;通過(guò)同源建模和分子對(duì)接,分析AsBe3蛋白與氟氯氰菊酯形成穩(wěn)定復(fù)合物的關(guān)鍵氨基酸殘基�！窘Y(jié)果】通過(guò)克隆得到了編碼AsBe3基因的序列,大小為1 302bp。在系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系方面,AsBe3蛋白在8種不同物種中具有很高的保守性。AsBe3蛋白是疏水性蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量為48.45kDa,無(wú)信號(hào)肽和跨膜區(qū)。氟氯氰菊酯與AsBe3蛋白的結(jié)合自由能約為-42.3kJ·mol^-1,理論上AsBe3蛋白能夠代謝氟氯氰菊酯�！窘Y(jié)論】研究結(jié)果為后續(xù)對(duì)AsBe3基因進(jìn)行生物學(xué)功能研究奠定了基礎(chǔ),為下一步開(kāi)展AsBe3蛋白代謝研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù),也為闡釋羧酸酯酶代謝抗性的分子機(jī)制提供了理論依據(jù)。 

【文章來(lái)源】：重慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,37(03)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

AsBe3的疏水區(qū)預(yù)測(cè)

以中華按蚊cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后，回收目的條帶，進(jìn)行連接轉(zhuǎn)化，陽(yáng)性菌液經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證后，最終分子克隆得到AsBe3基因。圖1顯示，AsBe3基因編碼區(qū)為1 302bp，共編碼433個(gè)氨基酸。2.2 同源性序列比對(duì)

經(jīng)分析后得到的AsBe3蛋白的理化性質(zhì)如表2所示。從表2中的不穩(wěn)定系數(shù)可知，該蛋白不穩(wěn)定。此外圖4顯示，AsBe3蛋白中Leu所占比例最大，達(dá)11.8%。圖3 8個(gè)物種Be3蛋白的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中華按蚊對(duì)常用殺蟲(chóng)劑的抗藥性監(jiān)測(cè)[J]. 張華勛,李凱杰,胡樂(lè)群,袁方玉,裴速建,肖斌,余品紅.  中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué). 2010(04)



本文編號(hào)：2980982