目的比較不同腸上皮細(xì)胞株在3D培養(yǎng)條件下形成腸類器官的潛能及特點(diǎn),為利用腸上皮細(xì)胞株培養(yǎng)腸類器官提供實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)。方法使用IEC-6、CT26.WT、Caco-2三種腸上皮細(xì)胞株進(jìn)行3D培養(yǎng),分析不同細(xì)胞株形成腸類器官的潛能。流式分選獲取Caco-2單細(xì)胞后使用Matrigel進(jìn)行培養(yǎng)并測定其生長速度。比較2D和3D培養(yǎng)條件下Caco-2細(xì)胞中腸道干細(xì)胞標(biāo)志物L(fēng)gr5、Olfm4及增殖標(biāo)志物Ki67的mRNA表達(dá)差異。免疫熒光染色分析2D和3D培養(yǎng)時(shí)Caco-2細(xì)胞內(nèi)Ki67陽性細(xì)胞及l(fā)amp1陽性溶酶體的分布特點(diǎn)。比較5 Gy和15 Gy照射后Caco-2來源腸類器官中TUNEL陽性細(xì)胞分布特點(diǎn)。結(jié)果 3D培養(yǎng)時(shí),Caco-2細(xì)胞可形成腸類器官,而IEC-6和CT26.WT細(xì)胞不能形成腸類器官,且單個(gè)Caco-2細(xì)胞也可形成腸類器官。Caco-2來源腸類器官中腸道干細(xì)胞標(biāo)志物L(fēng)gr5、Olfm4和細(xì)胞增殖標(biāo)志物Ki67的mRNA表達(dá)水平較2D培養(yǎng)時(shí)顯著降低（P<0.05）,Ki67陽性增殖細(xì)胞較2D培養(yǎng)顯著減少。Caco-2來源腸類器官中細(xì)胞內(nèi)溶酶體呈極性分布,與小腸組織切片中... 

【文章來源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(01)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

2D培養(yǎng)和3D培養(yǎng)10 d時(shí)3種腸上皮細(xì)胞株的形態(tài)對(duì)比

流式細(xì)胞儀分選Caco-2單細(xì)胞

3D條件下Caco-2單細(xì)胞形成腸類器官的動(dòng)態(tài)變化


本文編號(hào)：2979261