Vpr是人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus type 1,HIV-1）的輔助蛋白之一,在病毒復(fù)制及AIDS進(jìn)程中起重要作用。為了研究Vpr完成其生物學(xué)功能的分子機(jī)制,本研究利用酵母雙雜交技術(shù),從人的cDNA文庫(kù)中篩選,并經(jīng)免疫共沉淀技術(shù)證實(shí)NF-κB通路中的重要蛋白R(shí)elB與Vpr存在相互作用;發(fā)現(xiàn)RelB蛋白能促進(jìn)Vpr介導(dǎo)的對(duì)NF-κB報(bào)告基因的激活,也能促進(jìn)Vpr對(duì)HIV-1LTR的反式激活作用。利用流式細(xì)胞技術(shù)發(fā)現(xiàn)RelB促進(jìn)Vpr誘導(dǎo)細(xì)胞周期G2/M期停滯。上述結(jié)果表明,RelB輔助Vpr完成其轉(zhuǎn)錄激活以及調(diào)控細(xì)胞周期的功能。 

【文章來(lái)源】：病毒學(xué)報(bào). 2013,29(01)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    1 酵母雙雜交試驗(yàn)
    2 質(zhì)粒
    3 細(xì)胞培養(yǎng), 轉(zhuǎn)染及熒光素酶活性檢測(cè)
    4 RelB knockdown細(xì)胞系的構(gòu)建
    5 免疫共沉淀
    6 Western blot 蛋白樣品經(jīng)SDS-PAGE電泳后, 轉(zhuǎn)印至PVDF膜 （Millipore公司） , 然后用5%脫脂奶粉封閉45
    7 流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期
結(jié) 果
    1 酵母雙雜交篩選
    2 Vpr與RelB相互作用的確證
    3 RelB促進(jìn)Vpr對(duì)NF-κB報(bào)告基因的激活
    4 Vpr對(duì)NF-κB報(bào)告基因的激活依賴于內(nèi)源RelB
    5 RelB在Vpr反式激活HIV-1 LTR中的作用
    6 RelB對(duì)Vpr誘導(dǎo)G2/M期停滯的影響
討 論



本文編號(hào)：2975136