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旋毛蟲(chóng)和偽旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)時(shí)期排泄分泌產(chǎn)物iTRAQ法蛋白質(zhì)組學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2021-01-08 07:58
  目的探究旋毛蟲(chóng)和偽旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)時(shí)期排泄分泌產(chǎn)物(ESP)中的差異蛋白,分析兩者免疫抑制差異的原因和參與包囊形成的潛在功能蛋白。方法收集旋毛蟲(chóng)和偽旋毛蟲(chóng)ESP,采用二喹啉甲酸檢測(cè)法測(cè)定旋毛蟲(chóng)、偽旋毛蟲(chóng)ESP蛋白濃度,十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)檢測(cè)蛋白質(zhì)量,對(duì)經(jīng)過(guò)超濾管酶解法酶解后的ESP多肽段采用同位素相對(duì)定量和絕對(duì)定量標(biāo)記技術(shù)(iTRAQ)標(biāo)記,混合標(biāo)記后的樣品進(jìn)行液相分離高pH反相色譜和液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)。檢測(cè)完成后,搜索UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)中的旋毛蟲(chóng)(Trichinella spiralis)和偽旋毛蟲(chóng)(Trichinella pseiudospiralis)數(shù)據(jù)庫(kù),在可信蛋白(得分80以上)的基礎(chǔ)上篩選同源蛋白,比較同源蛋白的差異表達(dá)情況。利用QuickGO對(duì)差異蛋白進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化描述。選取9個(gè)差異明顯的重要蛋白進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證,采用△△Ct法驗(yàn)證基因表達(dá)水平。采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果經(jīng)iTRAQ標(biāo)記鑒定出旋毛蟲(chóng)可信蛋白492個(gè),偽旋毛蟲(chóng)535個(gè),可用于定量分析的旋毛蟲(chóng)蛋白193個(gè),偽旋毛蟲(chóng)蛋白164個(gè)。旋毛蟲(chóng)/偽旋毛蟲(chóng)同源比對(duì)... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志. 2020,38(01)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)

【部分圖文】:

旋毛蟲(chóng)和偽旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)時(shí)期排泄分泌產(chǎn)物iTRAQ法蛋白質(zhì)組學(xué)分析


qRT-PCR驗(yàn)證旋毛蟲(chóng)/偽旋毛蟲(chóng)部分蛋白在基因轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]旋毛蟲(chóng)成蟲(chóng)排泄分泌物對(duì)中性粒細(xì)胞功能的影響[J]. 王靜,丁靜,王春,王學(xué)林,白雪,唐斌,楊勇,王光明,劉明遠(yuǎn).  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2019(03)
[2]兩種蠕蟲(chóng)半胱氨酸蛋白酶抑制劑對(duì)小鼠腹腔滲出細(xì)胞一氧化氮產(chǎn)生及細(xì)胞因子分泌的影響[J]. 楊小迪,李徽徽,陶志勇,方強(qiáng),程洋,徐嵐松,薛仁敏,陳勇,夏惠,張慧,姜輝,劉濤,彭琨,陳興智.  中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志. 2017(02)
[3]旋毛蟲(chóng)成蟲(chóng)排泄分泌蛋白組分分析[J]. 楊小迪,陶志勇,程洋,吳琦,王小莉,宋迪,徐嵐松,薛仁敏,常雪蓮,張慧,汪瑞,陳興智,方強(qiáng).  中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志. 2017(01)
[4]質(zhì)譜法分析旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)排泄分泌蛋白的組分[J]. 羅婧梅,程露陽(yáng),關(guān)曉東,李丹,于莉,杜孌英.  中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志. 2016(01)
[5]旋毛蟲(chóng)對(duì)宿主免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 趙葛,楊文濤,王春鳳,楊桂連.  中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志. 2013(02)
[6]定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析鏈霉素耐藥和敏感結(jié)核分枝桿菌臨床分離株[J]. 朱傳智,趙雁林,黃香玉,逄宇,趙雅貞,莊玉輝,何秀云.  微生物學(xué)報(bào). 2013(02)
[7]旋毛蟲(chóng)成蟲(chóng)與肌幼蟲(chóng)排泄分泌抗原蛋白組分的比較分析[J]. 馬鳴旺,張志蘭,申麗潔,董明治.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2010(11)
[8]旋毛蟲(chóng)成囊前期幼蟲(chóng)排泄分泌抗原的研究進(jìn)展[J]. 董明治,申麗潔.  中國(guó)病原生物學(xué)雜志. 2009(10)



本文編號(hào):2964228

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