目的探討腸道病毒71型（EV71）誘導THP-1巨噬細胞自噬和凋亡及其相關信號通路。方法設置EV71處理組和DMEM對照組,EV71處理組是用感染復數0.1感染THP-1巨噬細胞2、8和16 h,對照組是用DMEM培養(yǎng)基作為陰性對照即是0 h組。CCK-8檢測EV71對THP-1巨噬細胞增殖和毒性的影響;熒光定量PCR法檢測EV71在細胞內病毒核酸變化情況;透射電鏡觀察THP-1巨噬細胞內超微結構變化;Hoechst 33342染色法和AnnexinV/PI雙染法檢測EV71誘導THP-1巨噬細胞凋亡的情況;免疫印跡法分析EV71誘導THP-1巨噬細胞自噬和凋亡相關蛋白水平的變化;用3-MA和Ac-DEVD-CHO抑制劑分別檢測EV71對THP-1巨噬細胞自噬和凋亡的影響。結果 EV71作用THP-1巨噬細胞2、8和16h的細胞存活率逐漸下降（P<0.05）;細胞內病毒核酸拷貝數逐漸增多（P<0.01）;可見細胞內自噬小體和病毒顆粒;總細胞凋亡率逐漸增加（P<0.01）;與對照組比較,EV71處理組LC3轉化量（LC3-II/LC3-I）逐漸增多,而p62蛋白逐漸減少... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學學報. 2020年06期 北大核心

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【部分圖文】：

RT-qPCR檢測THP-1巨噬細胞內病毒核酸濃度

通過Western blot檢測細胞自噬相關蛋白表達結果顯示，與0 h對比，EV71感染2、8和16 h時cleaved caspase3蛋白表達水平升高，caspase3和Bcl-2蛋白表達降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。與0 h對比，EV71感染2、8和16 h時cleaved caspase-8、Bak蛋白和Bax蛋白差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。圖3 Hoechst 33342染色觀察THP-1凋亡細胞核形態(tài)變化

圖2 透射電鏡檢測EV71病毒(KC122766)作用THP-1巨噬細胞的情況2.8 Ac-DEVD-CHO抑制EV71病毒誘導THP-1巨噬細胞的凋亡


本文編號：2951136