目的探討TGF-β對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖、凋亡的影響。方法采用RANKL和M-CSF誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)24 h后,用不同濃度TGF-β分別作用RAW264.7細(xì)胞24、48、72 h。使用CCK-8試劑盒、流式細(xì)胞術(shù)及RT-PCR檢測破骨前體細(xì)胞增殖、凋亡和特征性基因的表達(dá)差異。結(jié)果不同濃度（1、2、5 ng/mL）的TGF-β均能抑制RAW264.7細(xì)胞增殖,且與時(shí)間、濃度有關(guān)。TGF-β（5 ng/mL）處理組培養(yǎng)72 h后與其他濃度處理組相比,細(xì)胞增殖明顯降低,細(xì)胞總凋亡率及線粒體凋亡通道相關(guān)基因Caspase-3、Caspase-8表達(dá)升高,差異具有顯著性（P<0.05）。結(jié)論 TGF-β抑制RAW264.7細(xì)胞增殖,促進(jìn)其凋亡,表明TGF-β在骨改建中發(fā)揮重要作用。 

【文章來源】：臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2020年08期 北大核心

【文章頁數(shù)】：3 頁

【部分圖文】：

CCK-8檢測TGF-β對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖的影響:*P<0.05

骨組織缺損修復(fù)機(jī)制是目前關(guān)注的重點(diǎn),除骨創(chuàng)傷修復(fù)外,其還與骨質(zhì)疏松甚至骨腫瘤相關(guān)[5],且與牙槽骨吸收等口腔常見疾病有直接關(guān)系[6]。骨改建是一個(gè)連續(xù)的動(dòng)態(tài)過程,主要通過成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞間相互作用共同調(diào)控新骨形成達(dá)到骨重建。其中,破骨細(xì)胞來自骨髓單核/巨噬細(xì)胞系,負(fù)責(zé)吸收骨組織中的骨質(zhì),是影響骨折愈合的關(guān)鍵細(xì)胞之一[7]。近年,骨折愈合過程中TGF-β調(diào)節(jié)的研究成為焦點(diǎn)。作為功能相似、結(jié)構(gòu)相關(guān)的多肽生長因子和趨化因子,TGF-β影響骨生長、形態(tài)誘導(dǎo)和修復(fù),具有重要研究價(jià)值。多種研究表明,TGF-β對(duì)骨組織的影響是雙向的。長期以來TGF-β被認(rèn)為是一種骨吸收抑制劑,高濃度的TGF-β可以增強(qiáng)骨保護(hù)素(osteoprotegerin, OPG)和RANK的競爭性結(jié)合,從而抑制RANK與其配體的結(jié)合,導(dǎo)致破骨細(xì)胞的分化和成熟受到抑制。最近研究表明,在缺乏基質(zhì)細(xì)胞的體外環(huán)境中,TGF-β可以誘導(dǎo)破骨前體細(xì)胞中NF-κB和RANK的表達(dá),促進(jìn)破骨細(xì)胞的形成[8-9]。因此,其對(duì)破骨細(xì)胞增殖和凋亡的影響一直存在爭議。小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7是公認(rèn)的破骨前體細(xì)胞,體外可以誘導(dǎo)形成破骨細(xì)胞[10]。目前文獻(xiàn)報(bào)道TGF-β對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖、凋亡及相關(guān)基因表達(dá)的影響較小,且本課題組前期報(bào)道由于巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)與RANK在RAW264.7細(xì)胞系中可以同時(shí)表達(dá),由此激活RANKL從而使RAW264.7細(xì)胞誘導(dǎo)分化為破骨細(xì)胞[11]。故在此基礎(chǔ)上通過誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞建立破骨細(xì)胞模型進(jìn)行相關(guān)分析。圖3 TGF-β對(duì)RAW264.7細(xì)胞凋亡的影響

TGF-β對(duì)RAW264.7細(xì)胞凋亡的影響


本文編號(hào)：2946530