目的對(duì)2019新型冠狀病毒（2019-novel Coronavirus,2019-nCoV）核衣殼蛋白（nucleocapsid protein,NP）進(jìn)行原核表達(dá)、純化與鑒定,并應(yīng)用于2019-nCoV血清學(xué)診斷。方法合成2019-nCoV NP基因,克隆至pET28a載體中,構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒,并進(jìn)行誘導(dǎo)純化。純化蛋白經(jīng)SDS-PAGE、間接ELISA、Western blot（WB）、免疫層析法進(jìn)行鑒定。優(yōu)化間接ELISA反應(yīng)條件,進(jìn)行血清抗體檢測(cè)。結(jié)果重組NP經(jīng)鎳柱純化后SDS-PAGE電泳顯示相對(duì)分子質(zhì)量約50×103,與預(yù)期一致;間接ELISA、WB表明其能與2019-nCoV感染患者血清特異性結(jié)合;用免疫層析法發(fā)現(xiàn)對(duì)NP檢測(cè)限為0.2 ng/ml;間接ELISA檢測(cè)32份2019-nCoV感染者血清及對(duì)照血清,發(fā)現(xiàn)二者結(jié)果可見(jiàn)明顯分群。結(jié)論原核表達(dá)的NP具有良好的免疫原性,可用于制備血清學(xué)診斷試劑。 

【文章來(lái)源】：中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2020年04期

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2019新型冠狀病毒及其感染性肺炎[J]. 嚴(yán)杰,李明遠(yuǎn),孫愛(ài)華,彭宜紅.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2020(01)



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