為了探討慢病毒轉(zhuǎn)染SPOP基因后對滋養(yǎng)層細胞HTR8-SVneo增殖和侵襲能力的影響,并闡明其可能的機制,分別構(gòu)建過表達和敲低SPOP基因的慢病毒載體,轉(zhuǎn)入到HTR8-SVneo細胞中。分別在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染的熒光效率。用qRT-PCR法檢測感染病毒后的細胞中SPOP mRNA的表達量,Western blotting法檢測各組細胞中SPOP、PTEN、AKT、p-AKT、GSK3β、p-GSK3β和GAPDH的表達量。采用CCK-8法檢測各組細胞的增殖活力,Transwell小室法檢測各組細胞的侵襲能力。結(jié)果顯示,在HTR8-SVneo、JAR和JEG3這3種滋養(yǎng)層細胞中,HTR8-SVneo細胞中SPOP蛋白表達相對最高。HTR8-SVneo細胞經(jīng)慢病毒轉(zhuǎn)染后,與對照組比較,過表達組中SPOP mRNA和蛋白表達量明顯升高（p<0.01）,PTEN蛋白表達量升高,而p-AKT和p-GSK3β表達量降低,細胞的侵襲能力明顯下降（p<0.05）,細胞增殖活力無明顯變化。相反,敲低組中SPOP mRNA和蛋白表達量明顯下降（p<0.01）,PTEN蛋白表達量降低,p... 

【文章來源】：基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020年05期 北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

SPOP蛋白在3種人滋養(yǎng)層細胞系中的表達情況

轉(zhuǎn)染病毒后各組HTR8-SVneo細胞中EGFP蛋白的表達情況(×100)

使用Transwell小室法對HTR8-SVneo細胞侵襲能力進行測定。與對照空載體組相比，過表達SPOP組細胞侵襲數(shù)量減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。相反，敲低SPOP組細胞侵襲數(shù)量明顯增加，差異具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)(圖6)。圖4 qRT-PCR法檢測轉(zhuǎn)染后HTR8-SVneo細胞中SPOP m R-NA表達情況(t-test;**:p<0.01)

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2943197