研究背景和意義:支氣管哮喘（簡(jiǎn)稱哮喘）以氣道非特異性炎癥、氣道高反應(yīng)性及氣道重塑為主要特征[1-3]。氣道重塑被認(rèn)為是哮喘難治性和不易控制的重要因素。盡管現(xiàn)有以糖皮質(zhì)激素為代表,針對(duì)氣道炎癥的治療,可以讓多數(shù)哮喘患者得以控制。但是哮喘發(fā)病的慢性、易變性、發(fā)作性特征提示其發(fā)生機(jī)制的復(fù)雜性。近年來(lái)針對(duì)氣道重塑的干預(yù)成為哮喘研究的熱點(diǎn)[3,4],然而其啟動(dòng)機(jī)制及干預(yù)途徑尚不甚清楚。研究表明,神經(jīng)生長(zhǎng)因子（Nerve growth factor,NGF）與哮喘神經(jīng)源性炎癥、氣道高反應(yīng)性及氣道重塑密切相關(guān)[5-10],然而針對(duì)NGF治療哮喘的可行性及確切機(jī)制尚不清楚。研究目的:本研究在建立小鼠哮喘氣道重塑模型基礎(chǔ)上,探討腹腔內(nèi)注射和霧化吸入抗NGF抗體或微球?qū)ο瓪獾乐厮艿淖饔眉翱赡軐?duì)TGF-β/Smad信號(hào)通路的調(diào)節(jié)機(jī)制。研究方法:OVA致敏和激發(fā)建立小鼠氣道重塑模型,用聚合物合金方法制備具有緩釋性、長(zhǎng)效性的抗NGF微球。采用腹腔注射NGF、腹腔注射抗NGF抗體、霧化吸入抗NGF和霧化吸入抗NGF微球進(jìn)行干預(yù)。觀察各干預(yù)組對(duì)氣道炎癥、氣道反應(yīng)性和氣道重塑指標(biāo)的影響。檢測(cè)肺組織NGF和TGF-β... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖３．２對(duì)每組小鼠激發(fā)前后的平均肺氣道阻力的進(jìn)行比較（Ｍｃｈ濃度從６．２５?ｍｇ／ｍｌ增加到??

ＩＬ－１３的含量??為了探索抗－ＮＧＦ在氣道炎癥浸潤(rùn)的作用機(jī)制，采用ＮＧＦ和抗ＮＧＦ在哮喘??小鼠模型上做出對(duì)照性研宄分析。如圖３．３所示，抗－ＮＧＦ組明顯低于哮喘組（Ｐ??＜０．０５），與此相同變化的是嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、ＩＬ－?４、ＩＬ－１３的變化（Ｐ??＜０＿０５）。??Ａ?Ｂ??２００１?１８〇ｉ?＊??＋?■?ｃｏｎｔｒｏｌ?？?Ｉ??ｒ??ｆ１８０．?－Ａｓｔｈｍａ?１?１６０－?＇?Ｉ??Ｓ?１６０＇?Ｊ?？ＮＧＦ?Ｓ?１４０－?ＩＬ－１３?Ｉ??”０■?＿?Ａｎｔｉ－ＮＧＦ?？?１２〇．??２?１２０－國(guó)?＊?ｄ??￥１００■■丄?ｉ—?１?１〇°＇?Ｔ??＾?８〇．?ｍ?ｉｉ?；８〇－?１??ｉ?１１??Ｔｏｔａｌ?ｃｅｌｌｓ?Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｓ?Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ?ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ａｓｔｈｍａ?ＮＧＦ?Ａｎｔｉ－ＮＧＦ??圖３．３?（Ａ）抗ＮＧＦ治療對(duì)ＢＡＬＦ細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的影響；??（Ｂ）抗ＮＧＦ治療對(duì)ＩＬ－４和ＩＬ－１３水平的影響；￥被認(rèn)為是戶＜０．０５，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。??３．３抗－ＮＧＦ治療抑制哮喘小鼠氣道炎癥和氣道重塑??為了確定抗－ＮＧＦ治療參與氣道重塑的發(fā)展程度，我們?cè)u(píng)估了所有哮喘小鼠??支氣管旁的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，氣道平滑肌層厚度和氣道周圍的膠原含量的多少。??每組的切片均行ＨＥ染色（圖３．４）和行Ｍａｓｓｏｎ染色進(jìn)行評(píng)估氣道旁膠原的沉積情??況（

從π�、�?樂(lè)廝薌埃裕牽疲?穡?螅恚幔湫藕磐?罰崳?圖３．５各組小鼠肺內(nèi)切片ｍａｓｓｉｏｎ染色的病理結(jié)果（放大倍數(shù)ｍａｓｓｉｏｎｘ２００）??Ａ：無(wú)明顯異常；Ｂ：有支氣管旁Ｍａｓｓｏｎ染色的面積以及肺內(nèi)氣道旁膠原沉積增多；Ｃ：??支氣管旁Ｍａｓｓｏｎ染色的面積以及肺內(nèi)氣道旁膠原沉積明顯增加；Ｄ？？有少許Ｍａｓｓｏｎ染色??的面積以及肺內(nèi)氣道旁膠原沉積??３０?｜??ｉｉｌｌｌ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ａｓｔｈｍａ?ＮＧＦ?Ａｎｔｉ－ＮＧＦ??圖３．６各組氣道旁膠原蛋白面積的定量評(píng)價(jià)。??抗ＮＧＦ組與哮喘組相比較，Ｐ＜０．０５�？梗危牵平M與ＮＧＦ組相比較，戶＜０．０５。??３．４抗ＮＧＦ治療對(duì)肺組織中ＴＧＦ＿Ｐｉ和Ｐ－ｓｍａｄ３表達(dá)的影響??為了評(píng)估抗ＮＧＦ治療對(duì)ＴＧＦ－Ｐｉ信號(hào)的影響，分析小鼠體內(nèi)的ＴＧＦ－Ｐｉ在??ＢＡＬＦ以及肺組織樣本的ＴＧＦ－Ｐｉ的表達(dá)。同時(shí)，為了證實(shí)抗ＮＧＦ治療對(duì)哮喘的??影響，我們使用特異性抗體通過(guò)免疫組織化學(xué)來(lái)檢查哮喘小鼠肺部的ＴＧＦ－卩！和??Ｐ－ｓｍａｄ３的表達(dá)。如圖３．５Ｄ所示，在小鼠肺組織，各組的ＴＧＦ－Ｐｉ免疫組織化學(xué)??染色顯示，每組的肺組織部分都有免疫陽(yáng)性反應(yīng)顯色。ＴＧＦ－Ｉ３！主要分布在平滑??肌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，呈現(xiàn)為淡黃色至棕色，主要集中在氣道上皮細(xì)胞、黏膜下??層、炎性細(xì)胞和血管平滑肌層。ＮＧＦ組在氣道上皮細(xì)胞中表現(xiàn)出明顯的強(qiáng)陽(yáng)性??表現(xiàn)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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