抗SraP L-Lectin 抗體的制備及其抗金黃色葡萄球菌感染的功能研究
發(fā)布時間：2020-12-21 21:12
金黃色葡萄球菌富絲氨酸重復蛋白（Serine-rich repeat protein,SRRP）又稱富絲氨酸血小板結(jié)合蛋白（serine-rich adhesion for platelets,SraP）是金黃色葡萄球菌細胞壁錨定蛋白,其配體結(jié)合區(qū)的L-Lectin模序能夠識別并結(jié)合細胞膜表面的唾液酸化受體,該受體在哺乳動物的血小板、肺及胃腸道等細胞表面均有表達。研究表明,SraP能夠介導金黃色葡萄球菌與血小板的結(jié)合,促進感染性心內(nèi)膜炎的發(fā)生發(fā)展。本課題通過基因工程技術(shù)表達重組SraPL-Lectin抗原,繼而免疫小鼠,利用細胞融合技術(shù)制備抗SraPL-Lectin單克隆抗體,通過Western blot、ELISA等技術(shù)檢測抗體活性,并通過細胞和動物實驗,探討該抗體在抗金黃色葡萄球菌感染過程中的功能。目的:利用基因工程技術(shù)制備SraPL-Lectin重組蛋白,細胞融合技術(shù)制備抗SraPL-Lectin單克隆抗體,通過體內(nèi)外實驗明確抗SraPL-Lectin抗體在抗金黃色葡萄球...
【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：58 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
重組質(zhì)粒pET28a-srapL-Lectin的鑒定
重組蛋亡
圖 3.重組蛋白 SraPL-Lectin的純化與鑒定Figure3. Purification and identification of the recombinant SraPL-LectinDS-PAGE: M 標準蛋白分子量，1 流穿液，2 20mM 咪唑洗脫液，3 50mM 咪唑洗 100 mM 咪唑洗脫液，5 150 mM 咪唑洗脫液，6 200 mM 咪唑洗脫液，7 500 mM 咪液estern blot: M 標準蛋白分子量，1 抗 His 二抗鑒定重組蛋白 SraPL-Lectin 成功制備抗 SraPL-Lectin單克隆抗體.1 抗 SraPL-Lectin單克隆融合細胞株的篩選經(jīng) SraPL-Lectin抗原免疫，選取血清抗 SraPL-Lectin抗體效價最高的小鼠，胞與骨髓瘤細胞進行融合，經(jīng)過亞克隆篩選，最終選取 5 株穩(wěn)定表達抗PL-Lectin抗體的單克隆融合細胞株（圖 4）。
本文編號：2930513
【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：58 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
重組質(zhì)粒pET28a-srapL-Lectin的鑒定
重組蛋亡
圖 3.重組蛋白 SraPL-Lectin的純化與鑒定Figure3. Purification and identification of the recombinant SraPL-LectinDS-PAGE: M 標準蛋白分子量，1 流穿液，2 20mM 咪唑洗脫液，3 50mM 咪唑洗 100 mM 咪唑洗脫液，5 150 mM 咪唑洗脫液，6 200 mM 咪唑洗脫液，7 500 mM 咪液estern blot: M 標準蛋白分子量，1 抗 His 二抗鑒定重組蛋白 SraPL-Lectin 成功制備抗 SraPL-Lectin單克隆抗體.1 抗 SraPL-Lectin單克隆融合細胞株的篩選經(jīng) SraPL-Lectin抗原免疫，選取血清抗 SraPL-Lectin抗體效價最高的小鼠，胞與骨髓瘤細胞進行融合，經(jīng)過亞克隆篩選，最終選取 5 株穩(wěn)定表達抗PL-Lectin抗體的單克隆融合細胞株（圖 4）。
本文編號：2930513
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