目的探討新生大鼠原代海馬神經(jīng)元的分離培養(yǎng)及鑒定方法。方法選取新生24 h內(nèi)SD大鼠,處死后分離海馬體,運(yùn)用機(jī)械分離及胰蛋白酶消化法制備單細(xì)胞懸液,離心后以5.0×10~5/mL的密度種植于24孔板內(nèi),每3～4 d更換培養(yǎng)液的1 2～1 3。結(jié)果提取的原代海馬神經(jīng)元于24 h后貼壁,并逐漸生長為梭形;培養(yǎng)3 d后神經(jīng)元形成突起,逐漸增多,并不斷延伸;培養(yǎng)4 d后開始形成清晰的神經(jīng)纖維網(wǎng)絡(luò),胞體豐滿,胞體周圍可見光暈,貼壁良好;培養(yǎng)10 d后神經(jīng)元發(fā)育更加成熟,神經(jīng)纖維網(wǎng)絡(luò)更加密集。熒光顯微鏡下,可見微管相關(guān)蛋白在海馬神經(jīng)元細(xì)胞體和樹突中表達(dá),神經(jīng)元細(xì)胞陽性率為95%以上。結(jié)論經(jīng)改良既往實(shí)驗(yàn)方法,得到可培養(yǎng)出細(xì)胞活性高、神經(jīng)元陽性率高的新生大鼠海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)方法。 

【文章來源】：蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020年03期

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

采用MAP2一抗及Alexa Fluor 488標(biāo)記山羊抗小鼠IgG(H+L）二抗對(duì)培養(yǎng)的新生大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞（Hoechst 33342染核，100×）

提取的原代海馬神經(jīng)元于24 h后貼壁，并逐漸生長為梭形，培養(yǎng)3 d后神經(jīng)元形成突起，逐漸增多，并不斷延伸，4 d后開始形成清晰的神經(jīng)纖維網(wǎng)絡(luò)，神經(jīng)元胞體豐滿，胞體周圍可見光暈，貼壁良好。培養(yǎng)10 d后神經(jīng)元發(fā)育更加成熟，神經(jīng)纖維網(wǎng)絡(luò)更加密集，見圖1。2.2 免疫熒光鑒定神經(jīng)元

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]阿糖胞苷對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)的影響[J]. 張余,劉英富,陳旭義,涂悅,梁冰,徐忠偉,趙永青.  中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2016(03)
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[3]胎鼠海馬神經(jīng)元的無血清原代培養(yǎng)方法與形態(tài)學(xué)觀察[J]. 潘永英,趙柏松,陳茜,宋興榮.  國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào). 2014 (17)



本文編號(hào)：2926570