目的分析人血小板及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活前后對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞（L929）和人成纖維細(xì)胞（HDP）的增殖作用。方法將所制備的新鮮人富血小板血漿（PRP）3份及血小板濃縮液（PC）5份（50 mL/份）,分別用20 mL 0.9%生理鹽水洗滌2次,重懸以獲得貧血小板血漿（PPP）、生理鹽水上清、洗滌血小板（WP）3個(gè)組分,同未經(jīng)處理的PRP及PC一道,分別凍融留取對(duì)照樣品后作補(bǔ)體滅活處理,ELASA方法測(cè)試補(bǔ)體滅活前后血小板源性生長(zhǎng)因子（PDGF-AB）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF-β1）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、表皮生長(zhǎng)因子（EGF）含量,CCK-8試劑盒測(cè)定補(bǔ)體滅活前后對(duì)L929/HDP細(xì)胞的增殖作用。結(jié)果 PRP及洗滌各組分補(bǔ)體滅活前后PDGF-AB、VEGF及EGF含量比較,P>0.05,PC及各組分補(bǔ)體滅活前后PDGF-AB、VEGF、EG及TGF-β1含量比較均無(wú)明顯差異（P>0.05）。PRP及WP促L929細(xì)胞增殖比較:PRP為0.68±0.12 vs 2.13±0.18（P<0.05）,WP為0.69±0.12 vs 0.66±0.13（P>... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)輸血雜志. 2013年07期 北大核心

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ＲP樣品及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活對(duì)L929細(xì)胞的增殖作用

);各組分補(bǔ)體滅活前細(xì)胞增殖率比較，生理鹽水上清與WP、PPP有明顯差異(t值分別為0.99、6.78，P＜0.05);各組分補(bǔ)體滅活后細(xì)胞增殖率比較，WP與生理鹽水上清、PPP有明顯差異(t值分別為2.81.、2.85，P＜0.05)(圖1)。圖1PＲP樣品及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活對(duì)L929細(xì)胞的增殖作用2.3.2PＲP及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活對(duì)HDP細(xì)胞增殖的影響補(bǔ)體滅活前后HDP細(xì)胞增殖率:PＲP為1.36±0.09vs1.30±0.11，WP為1.26±0.04vs1.33±0.10，生理鹽水上清為1.01±0.08vs0.98±0.04，PPP為1.21±0.08vs1.22±0.12(圖2)。圖2PＲP樣品及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活對(duì)HDP細(xì)胞的增殖作用2.3.3PC及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活對(duì)L929細(xì)胞增殖的影響補(bǔ)體滅活前后L929細(xì)胞增殖率:PC為0.42±0.05vs1.94±0.19(t=6.52，P＜0.05)，WP為1.69±0.13vs1.93±0.19，生理鹽水上清為0.88±0.13vs1.01±0.12，PPP為0.64±0.14vs1.49±0.15(t=3.36，P＜0.05);各組分補(bǔ)中國(guó)輸血雜志2013年7月第26卷第7期ChinJBloodTransfusionJuly，2013，Vol．26，No．7·609·

體滅活前細(xì)胞增殖率比較，WP與生理鹽水上清、PPP有明顯差別(t值分別為4.84、0.17，P＜0.05);各組分補(bǔ)體滅活后細(xì)胞增率比較，WP與生理鹽水上清差別明顯(t=7.26，P＜0.05)(圖3)。另外，光鏡下顯示;滅活前PC對(duì)L929細(xì)胞有明顯的抑制作用，滅活后促細(xì)胞增殖作用明顯，而滅活前后WP對(duì)L929細(xì)胞的促進(jìn)作用均較明顯(圖4)。圖3PC樣品及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活對(duì)L929細(xì)胞的增殖作用A補(bǔ)體滅活前B補(bǔ)體滅活后注:APC;BWP圖4PC樣品及其WP補(bǔ)體滅活L929細(xì)胞增殖的影響2.3.4PC及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活對(duì)HDP細(xì)胞增殖的影響補(bǔ)體滅活前后HDP細(xì)胞增殖率:PC為1.32±0.07vs1.28±0.09，WP為1.39±0.13vs1.44±0.13，生理鹽水上清為1.06±0.08vs1.10±0.07，PPP為1.28±0.11vs1.43±0.09。組細(xì)胞的增殖率，未滅活補(bǔ)體:;各組分補(bǔ)體滅活前后細(xì)胞增殖率比較，WP與生理鹽水上清具有明顯差別(t滅活前=6.11、t滅活后=4.50，P＜0.05)(圖5)。圖5PC樣品及其洗滌后獲得的各組分補(bǔ)體滅活對(duì)HDP細(xì)胞的增殖作用3討論血小板相關(guān)制劑促細(xì)胞增殖是多因素協(xié)同作用的復(fù)雜過(guò)程［6］，我們將PＲP及PC用生理鹽水洗滌，獲得WP、生理鹽水上清、PPP，加之做對(duì)照的PＲP與PC，分別測(cè)試凍融法制備的各組分PDGF-AB、VEGF、EGF及TGF-β1含量:補(bǔ)體滅活前后各PGFs含量相近(表1)。早有研究者指出部分PGFs(如PDGF-AB)的熱穩(wěn)定性好［8，9］，我們選取4種PGFs所作的測(cè)試顯示，補(bǔ)體滅活過(guò)程對(duì)其活性的影響較校血小板保存時(shí)間不同，血小板及其經(jīng)洗滌獲得組分的PGFs含量便存在一定差異:新鮮靜脈血制備的PＲP洗滌后，各種PGFs含量在生理鹽水上清均較其他3種組分少(P＜0.05);血站制備的PC洗滌后，不但各種PGFs在生理鹽水上清中含量均較少，而且明顯也低于P

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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