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骨髓微環(huán)境中內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)造血干細(xì)胞擴(kuò)增的調(diào)控研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-10 16:39
  造血干細(xì)胞(Hematopoietic stem cells,HSCs)是造血系統(tǒng)中具有自我更新和分化成所有成熟血液譜系能力的一類群細(xì)胞,它們對(duì)于維持機(jī)體的造血內(nèi)穩(wěn)態(tài)以及免疫功能尤為重要。HSCs移植已經(jīng)被認(rèn)為是治療部分造血系統(tǒng)惡性腫瘤、骨髓和造血障礙以及免疫缺陷的有效療法,但是在臨床上仍存在局限,比如骨髓移植以及外周血HSCs移植的配型困難、供體不足以及免疫排斥反應(yīng)等。而臍帶血HSCs移植雖然克服了這些困難,但單個(gè)臍帶中的HSCs的數(shù)量有限,不足以滿足病人的造血重建需求。HSCs的體外擴(kuò)增是解決這一困難的最直接而有效辦法。但由于缺乏良好的培養(yǎng)體系,目前HSCs的體外擴(kuò)增還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能達(dá)到臨床要求。目前已有研究證明主動(dòng)脈-性腺-中腎(aorta–gonad–mesonephros,AGM)區(qū)以及卵黃囊動(dòng)脈附近的內(nèi)皮細(xì)胞可以支持HSCs的體外擴(kuò)增,而其他成體組織分離的內(nèi)皮細(xì)胞沒(méi)有這種能力。經(jīng)過(guò)不斷嘗試,我們確定無(wú)血清共培養(yǎng)體系,將卵黃囊內(nèi)皮細(xì)胞與LSK(Lin-Sca1+ckit+)細(xì)胞共培養(yǎng)九天后,與單獨(dú)培養(yǎng)LSK細(xì)胞的對(duì)照... 

【文章來(lái)源】:上海師范大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

骨髓微環(huán)境中內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)造血干細(xì)胞擴(kuò)增的調(diào)控研究


Notch信號(hào)通路示意圖

祖細(xì)胞,集落,粒細(xì)胞,巨噬細(xì)胞


18圖 2-2 克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果A: 10x10 倍放大被倍數(shù)下紅細(xì)胞祖細(xì)胞集落(BFU-E)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞祖細(xì)胞集落(CFU-GM)、多潛能粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和巨核細(xì)胞祖細(xì)胞集落(CFU-GEMM)生長(zhǎng)形態(tài)圖像;B: 第三天計(jì)數(shù)紅細(xì)胞祖細(xì)胞集落(BFU-E)量化圖;C:第七天計(jì)數(shù)粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落(CFU-GM)量化圖;D:第十四天計(jì)數(shù)多潛能粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和巨核細(xì)胞祖細(xì)胞集落(CFU-GEMM)量化圖;E:第十四天計(jì)數(shù)克隆總數(shù)量化圖!*”代表 P<0.05,“**”代表 P<0.01,“***”代表 P<0.001。共培養(yǎng) 9 天后,我們收集 co-cultivation 組和 control 組中三個(gè)副孔的所有細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù) 1.5x103個(gè)種到 1 ml M3434 半固體甲基纖維素培養(yǎng)基中,每個(gè)樣品 3個(gè)平行樣。圖 2-2A 圖分別為原始紅細(xì)胞祖細(xì)胞(BFU-E),粒細(xì)胞 - 巨噬細(xì)胞祖細(xì)胞

譜系,競(jìng)爭(zhēng)性,骨髓移植,小鼠


20圖 2-3 小鼠競(jìng)爭(zhēng)性骨髓移植實(shí)驗(yàn)流式分析結(jié)果A:小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植一個(gè)月后外周血嵌合率流式分析圖; B:小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植第一個(gè)月后外周血嵌合率量化圖;C:小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植第二個(gè)月外周血嵌合率量化圖;D:小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植第三個(gè)月外周血嵌合率量化圖;E:小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植后第三個(gè)月外周血譜系分化量化圖;F: 小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植后第四個(gè)月外周血嵌合率量化圖;G:小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植后第四個(gè)月外周血譜系分化量化圖;H: 小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植后第四個(gè)月骨髓嵌合率量化圖;I:小鼠骨髓競(jìng)爭(zhēng)性移植后第四個(gè)月骨髓譜系分化量化圖“*”代表 P<0.05,“**”代表 P<0.01,“***”代表 P<0.001。


本文編號(hào):2909021

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