目的:EB病毒與人類多種良惡性疾病相關(guān),如單核細(xì)胞增多癥、Burkitt淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、移植后淋巴增生性疾病等。長(zhǎng)期以來(lái),由于缺乏合適的動(dòng)物模型,EB病毒與相關(guān)疾病等研究進(jìn)展緩慢。樹(shù)鼩是一種與靈長(zhǎng)類親緣關(guān)系近的小型新興實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,在研究人類疾病方面有著巨大潛力。本課題組在前期研究中初步建成了EB病毒感染樹(shù)鼩模型,本研究將進(jìn)一步對(duì)樹(shù)鼩感染EB病毒模型進(jìn)行探索。我們通過(guò)對(duì)樹(shù)鼩進(jìn)行口鼻接種EB病毒后對(duì)其靜脈注射環(huán)孢素A進(jìn)行免疫抑制,檢測(cè)其EB病毒基因、蛋白等表達(dá)情況及組織病理改變,探究在此狀態(tài)下EB病毒在樹(shù)鼩體內(nèi)是否具有與人類相似的生物學(xué)特性,初步探索樹(shù)鼩是否可以作為EB病毒相關(guān)疾病動(dòng)物模型。方法:選取健康成年樹(shù)鼩20只,實(shí)驗(yàn)組樹(shù)鼩16只,對(duì)照組4只樹(shù)鼩。實(shí)驗(yàn)組通過(guò)口鼻接種液1ml 1.2×10⁸copies/ml EB病毒液,對(duì)照組以同樣方式接種1ml生理鹽水,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組樹(shù)鼩觀察6周后注射環(huán)孢素A 20mg/kg/天,連續(xù)注射6周。樹(shù)鼩定期通過(guò)股靜脈采血,分離外周血單個(gè)核細(xì)胞及血清;對(duì)樹(shù)鼩進(jìn)行解剖,收集重要器官組織。我們對(duì)樹(shù)鼩進(jìn)行外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù);qP... 

【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PBMCs中EB病毒載量的變化（Ts1-16）

圖 3-1. PBMCs 中 EB 病毒載量的變化（Tsure3-1.EBV copy number in PBMCs of tree shrew察期間均未檢測(cè)到 EB 病毒拷貝數(shù)

（1）EBNA1 和 EBNA2 的表達(dá)情況：圖 3-4 中總結(jié)了實(shí)驗(yàn)組每一只物在對(duì)應(yīng)的時(shí)間（周）檢測(cè) EBNA1 和 EBNA2 的表達(dá)情況，藍(lán)色框內(nèi)表免疫抑制后第一周。實(shí)驗(yàn)組樹(shù)鼩接種 EB 病毒后未注射免疫抑制劑之前觀期間內(nèi)，經(jīng)過(guò) RT-PCR 的檢測(cè)，可觀察到，在病毒感染后 6 周的觀察期EBNA1、EBNA2 的表達(dá)頻次不高，散在出現(xiàn)，集中在接種病毒后的第 周。注射免疫制劑后，EBNA1、EBNA2 在不同動(dòng)物中表達(dá)，出現(xiàn)不同程的表達(dá)增多，EBNA2 較為明顯。但 Ts7,9,15 無(wú)論在注射免疫抑制劑前后沒(méi)有出現(xiàn) EBNA1 的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組樹(shù)鼩在停止注射免疫抑制劑之后，EBN仍然持續(xù)表達(dá)。EBNA2 的表達(dá)主要出現(xiàn)在免疫抑制后階段，Ts4,9,15 在個(gè)觀察期間均未表達(dá) EBNA2，其余動(dòng)物均在注射環(huán)孢素 A 免疫抑制后表EBNA2 基因產(chǎn)物。在 RT-PCR 的實(shí)驗(yàn)中內(nèi)參：β-actin，陽(yáng)性對(duì)照：B9的 cDNA。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]全基因組測(cè)序與病毒捕獲測(cè)序技術(shù)探討EB病毒進(jìn)化及整合規(guī)律的初步研究[D]. 喻正源.中南大學(xué) 2013



本文編號(hào)：2908053