目的研究鼠疫耶爾森菌氣溶膠發(fā)生與采樣過程中的生物活性損傷程度,探索減輕其損傷的方法。方法采用液體撞擊式采樣器對鼠疫耶爾森菌和粘質(zhì)沙雷菌氣溶膠進行采樣和培養(yǎng)計數(shù)的方法,觀察氣溶膠發(fā)生與級聯(lián)沖擊采樣測試過程中的生物活性損傷情況,以及不同采樣液對生物活性的保護效果。結(jié)果鼠疫耶爾森菌氣溶膠經(jīng)AGI-10采樣器采樣10 min的生物活性損傷為98.63%,經(jīng)發(fā)生器發(fā)生及AGI-10采樣器采樣10 min的生物活性損傷為98.80%,其采樣和氣溶膠發(fā)生采樣過程生物活性損傷依次是粘質(zhì)沙雷菌的160.36%和116.62%。PBS采樣液在5 min采樣時基本沒有生物損傷,采樣液加入吐溫80和橄欖油可對30 min采樣的鼠疫耶爾森菌活性提供有效的保護。結(jié)論鼠疫耶爾森菌在氣溶膠發(fā)生與采樣過程中生物活性損傷較大,其采樣活菌數(shù)需進行校正,其氣溶膠發(fā)生與采樣方法需進行優(yōu)化。該菌液體沖擊式采樣的優(yōu)選采樣介質(zhì)為PBS+0.01%吐溫80+0.005%橄欖油。
【部分圖文】：

將5個(編號Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)AGI-10采樣器中，在采樣器I中倒入菌液10 m L(菌液理論濃度均為106cfu/m L)，其余4個采樣器中各倒入10 m L無菌氯化鈉采樣液，然后連接帶濾膜的過濾器及采樣泵(圖1)。啟動抽氣泵采樣10 min(采樣流量為6 L/min)后關(guān)閉所有氣路。測試結(jié)束后對各級采樣器內(nèi)采樣液體積進行測量，采樣液涂布培養(yǎng)基平板培養(yǎng)計數(shù)檢測濃度。以公式1計算的細菌存活率，公式2計算級聯(lián)采樣后的鼠疫耶爾森菌相對粘質(zhì)沙雷菌的生物活性損傷率，以公式3計算第一級采樣器(I)的細菌氣溶膠逃逸率。(公式中:CA為采樣前采樣液I濃度(cfu/m L),VI為采樣前采樣液I體積(m L),CA’為采樣后采樣液I濃度(cfu/m L)…C"V為采樣后采樣液V濃度(cfu/m L),V"A為采樣后采樣液I體積(m L)…V"V為采樣后采樣液V體積(m L)。Sy為鼠疫耶爾森菌存活率，Ss為粘質(zhì)沙雷菌存活率。)

試驗比較了鼠疫耶爾森菌在6種采樣液中進行5 min或30 min的液體沖擊式采樣后，其生物活性的保持程度即校正存活率(圖2)。3種采樣液對于鼠疫耶爾森菌的保護效果有明顯差異(P<0.05)，其中BHI(腦心浸液丙酮肉湯)作為采樣液為鼠疫耶爾森菌提供營養(yǎng)導(dǎo)致采樣樣本濃度偏高，生理鹽水(Saline)作為采樣液有明顯的生物損傷導(dǎo)致采樣樣本濃度偏低，PBS(磷酸鹽緩沖液)作為采樣液基本沒有生物損傷;30 min采樣的細菌活性損傷明顯高于5 min采樣(P<0.05)。隨著采樣時間延長鼠疫耶爾森菌活性會不斷下降;吐溫80和橄欖油等添加劑的加入可對長時間采樣(30 min)的鼠疫耶爾森菌活性提供有效的保護(P<0.05)，同時也可以抑制鼠疫耶爾森菌在BHI中的增殖(P<0.05)。結(jié)果提示，在進行鼠疫耶爾森菌的氣溶膠采樣試驗中應(yīng)選擇PBS作為采樣液，若長時間采樣樣本可在采樣液中加入100 mg/L吐溫80和50 mg/L橄欖油。3 討論
【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 肖麗生;祁芝珍;呂瑞辰;宋凱;陳榮;王敏;吳海蓮;趙海紅;宋亞軍;;鼠疫耶爾森菌基因組無痕修飾方法的建立[J];軍事醫(yī)學;2017年03期

2 古文鵬;景懷琦;;耶爾森菌致病機理研究[J];中國人獸共患病學報;2010年09期

3 王紅婭;劉月淑;王玲;王翠蘭;徐錫;張桂芳;;耶爾森菌選擇培養(yǎng)基在鼠疫耶爾森菌分離培養(yǎng)中的應(yīng)用[J];寧夏醫(yī)學雜志;2011年03期

4 江凌曉,郭兆彪,周冬生,楊瑞馥,俞守義;鼠疫耶爾森菌外膜蛋白的克隆與表達[J];中國公共衛(wèi)生;2004年12期

5 萬馬,樊振亞;鼠疫耶爾森菌的分子生物學研究進展[J];中國地方病防治雜志;1999年06期

6 陳鄔錦;李澤慧;張海鵬;丁奕博;段然;梁俊容;景懷琦;王鵬;;麗江市動物感染致病耶爾森菌調(diào)查及其病原學研究[J];中國病原生物學雜志;2018年05期

7 黃海,馬文麗,鄭文嶺;鼠疫耶爾森菌基因組研究進展[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);2003年02期

8 白雪薇;張懿輝;楊曉燕;牛艷芬;劉合智;史獻明;李玉貴;杜國義;;河北省鼠疫耶爾森菌生化性狀研究[J];中國地方病防治雜志;2016年05期

9 李可維;景懷琦;;致病性耶爾森菌感染與細胞因子相關(guān)性的研究進展[J];中國人獸共患病學報;2013年01期

10 梁俊容;景懷琦;;耶爾森菌抵抗宿主免疫并誘導(dǎo)吞噬細胞凋亡機制研究[J];中國人獸共患病學報;2011年08期

相關(guān)博士學位論文 前4條

1 何映霞;鼠疫耶爾森菌在進化的過程中丟失O抗原以及保留ail基因在其致病機制中的作用[D];華中科技大學;2018年

2 江凌曉;應(yīng)用蛋白質(zhì)芯片技術(shù)分析鼠疫耶爾森菌致病相關(guān)蛋白抗體表達譜的實驗研究[D];第一軍醫(yī)大學;2004年

3 胡靜;EAggEC攜帶的耶爾森菌HPI毒力的功能研究[D];第一軍醫(yī)大學;2002年

4 曹葉;鼠疫耶爾森菌外膜蛋白J參與宿主免疫逃逸機制的研究[D];吉林大學;2017年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 李楚楚;致病性小腸結(jié)腸炎耶爾森菌外膜蛋白A功能初步研究[D];江蘇大學;2018年

2 陳妤煌;致病性耶爾森菌外膜蛋白A同源性分析及免疫學特征研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2016年

3 李可維;致病性耶爾森菌外膜蛋白A基因多態(tài)性研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2013年

4 王鑫;中國小腸結(jié)腸炎耶爾森菌分子流行病學研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2009年

5 梁俊容;中國小腸結(jié)腸炎耶爾森菌在生豬中的分布及傳播方式的研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2012年

6 陳鄔錦;云南省部分鼠疫疫源地小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的分離及其病原學研究[D];大理大學;2016年

7 羅敏紅;建立環(huán)介導(dǎo)等溫擴增方法檢測腹瀉患者中的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌[D];南方醫(yī)科大學;2013年

8 孫文魁;小腸結(jié)腸炎耶爾森菌生物學特性和分子分型研究[D];山東大學;2013年

9 王增國;我國部分地區(qū)攜帶ystB基因小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的分子流行病學研究[D];江蘇大學;2008年

10 李旭;小腸結(jié)腸炎耶爾森菌在中國宿主動物間分布特征與致病性小腸結(jié)腸炎耶爾森菌ystA基因功能研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2015年

本文編號：2870961