鼠疫耶爾森菌氣溶膠發(fā)生與采樣過(guò)程的生物活性損傷研究
【部分圖文】:
將5個(gè)(編號(hào)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)AGI-10采樣器中,在采樣器I中倒入菌液10 m L(菌液理論濃度均為106cfu/m L),其余4個(gè)采樣器中各倒入10 m L無(wú)菌氯化鈉采樣液,然后連接帶濾膜的過(guò)濾器及采樣泵(圖1)。啟動(dòng)抽氣泵采樣10 min(采樣流量為6 L/min)后關(guān)閉所有氣路。測(cè)試結(jié)束后對(duì)各級(jí)采樣器內(nèi)采樣液體積進(jìn)行測(cè)量,采樣液涂布培養(yǎng)基平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)檢測(cè)濃度。以公式1計(jì)算的細(xì)菌存活率,公式2計(jì)算級(jí)聯(lián)采樣后的鼠疫耶爾森菌相對(duì)粘質(zhì)沙雷菌的生物活性損傷率,以公式3計(jì)算第一級(jí)采樣器(I)的細(xì)菌氣溶膠逃逸率。(公式中:CA為采樣前采樣液I濃度(cfu/m L),VI為采樣前采樣液I體積(m L),CA’為采樣后采樣液I濃度(cfu/m L)…C"V為采樣后采樣液V濃度(cfu/m L),V"A為采樣后采樣液I體積(m L)…V"V為采樣后采樣液V體積(m L)。Sy為鼠疫耶爾森菌存活率,Ss為粘質(zhì)沙雷菌存活率。)
試驗(yàn)比較了鼠疫耶爾森菌在6種采樣液中進(jìn)行5 min或30 min的液體沖擊式采樣后,其生物活性的保持程度即校正存活率(圖2)。3種采樣液對(duì)于鼠疫耶爾森菌的保護(hù)效果有明顯差異(P<0.05),其中BHI(腦心浸液丙酮肉湯)作為采樣液為鼠疫耶爾森菌提供營(yíng)養(yǎng)導(dǎo)致采樣樣本濃度偏高,生理鹽水(Saline)作為采樣液有明顯的生物損傷導(dǎo)致采樣樣本濃度偏低,PBS(磷酸鹽緩沖液)作為采樣液基本沒(méi)有生物損傷;30 min采樣的細(xì)菌活性損傷明顯高于5 min采樣(P<0.05)。隨著采樣時(shí)間延長(zhǎng)鼠疫耶爾森菌活性會(huì)不斷下降;吐溫80和橄欖油等添加劑的加入可對(duì)長(zhǎng)時(shí)間采樣(30 min)的鼠疫耶爾森菌活性提供有效的保護(hù)(P<0.05),同時(shí)也可以抑制鼠疫耶爾森菌在BHI中的增殖(P<0.05)。結(jié)果提示,在進(jìn)行鼠疫耶爾森菌的氣溶膠采樣試驗(yàn)中應(yīng)選擇PBS作為采樣液,若長(zhǎng)時(shí)間采樣樣本可在采樣液中加入100 mg/L吐溫80和50 mg/L橄欖油。3 討論
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