目的探討TGFβ1對胚胎肝前體細(xì)胞(HPC)分化的影響。方法體外培養(yǎng)HPC-E14. 5細(xì)胞株并以細(xì)胞免疫熒光染色法鑒定。將細(xì)胞分為對照組(HPC)、HPC+TGFβ1組和HPC+SB431542組。HPC+TGFβ1組滴加外源性TGFβ1,HPC+SB431542組加入TGFβ1受體抑制劑SB431542,處理72 h后通過qRT-PCR法和Western Blot法分別檢測AFP、Alb、細(xì)胞角蛋白19(CK19)mRNA及蛋白的表達(dá)情況;糖原染色法檢測細(xì)胞分化后的功能。計(jì)量資料多組間比較采用單因素方差分析,進(jìn)一步兩兩比較采用Dunnett's t檢驗(yàn)。結(jié)果 qRT-PCR檢測結(jié)果:對照組的AFP mRNA表達(dá)量高于其他兩組(F=128. 937,P 0. 01),HPC+TGFβ1組的CK19 mRNA表達(dá)量高于其他兩組(F=414. 467,P 0. 01),HPC+SB431542組的Alb mRNA表達(dá)量最高(F=794. 929,P 0. 01)。Western Blot法檢測結(jié)果:對照組的AFP蛋白表達(dá)量高于其他兩組(F=269. 000,P 0. 01),HPC+TGFβ1組的CK19蛋白表達(dá)量高于其他兩組(F=93. 010,P 0. 01),HPC+SB431542組的Alb蛋白表達(dá)水平均較其他兩組明顯升高(F=1086. 000,P 0. 01)。糖原染色法結(jié)果:對照組的糖原染色表達(dá)陽性面積比例小于其他兩組(F=79. 251,P 0. 05)。結(jié)論 TGFβ1信號誘導(dǎo)HPC向有功能的膽管細(xì)胞分化,而阻斷TGFβ1信號通路后HPC具有向成熟肝細(xì)胞分化的趨勢,分化后的膽管細(xì)胞和肝細(xì)胞具有正常的糖原儲存和合成功能,這些細(xì)胞可能能夠參與代謝活動。
【部分圖文】：

HPC組的糖原染色表達(dá)陽性面積比例比其余2組低(P<0.05)(表2，圖3)，提示TGFβ1信號通路誘導(dǎo)HPC分化后的膽管細(xì)胞和肝細(xì)胞具有正常的糖原儲存和合成功能，這些細(xì)胞可能能夠參與代謝活動。圖3 HPC分化后糖原染色表達(dá)情況(×200)

HPC免疫熒光鑒定結(jié)果(×200)

HPC分化后糖原染色表達(dá)情況(×200)
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