目的探討周細(xì)胞(pericyte, PC)對(duì)失血性休克(hemorrhagic shock, HS)大鼠血管滲漏的保護(hù)作用。方法采用失血性休克(血壓30 mmHg,維持3 h)模型,將12～24周齡SD大鼠(雌雄各半,體質(zhì)量200～220 g)分成4組(n=16):假手術(shù)組(Sham組)、失血性休克組(HS組)、乳酸林格氏液治療組(LR組)、PC治療組(PC組),治療組在失血性休克大鼠血壓至30 mmHg,維持3 h后開始治療,治療12 h后取材,觀察不同處理組大鼠肺靜脈上的周細(xì)胞數(shù)量、肺血管及腸系膜微血管的通透性、內(nèi)皮緊密連接ZO-1和黏附連接VE-cadherin的表達(dá)變化。結(jié)果與正常對(duì)照組相比,失血性休克大鼠血管滲漏明顯加重(P0.05),周細(xì)胞數(shù)量減少,內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)緊密連接破壞,內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接ZO-1和黏附連接VE-cadherin的表達(dá)明顯降低(P0.05)。LR治療12 h后能夠輕微降低失血性休克大鼠的血管通透性;緊密連接開放程度輕微降低,內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接ZO-1和黏附連接VE-cadherin的表達(dá)輕微升高。與LR組相比,PC治療12 h后,失血性休克大鼠肺靜脈上周細(xì)胞數(shù)量增加;細(xì)胞形態(tài)恢復(fù),超微結(jié)構(gòu)緊密連接開放程度顯著降低;內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接ZO-1和黏附連接VE-cadherin的表達(dá)明顯著升高(P0.05),恢復(fù)至接近正常水平;血管滲漏明顯改善,腸系膜微血管通透性顯著降低。結(jié)論周細(xì)胞對(duì)失血性休克大鼠血管滲漏具有明顯的保護(hù)作用。
【部分圖文】：

提取的原代周細(xì)胞培養(yǎng)3～5代后,用PDGFR-β和NG-2鑒定周細(xì)胞。光鏡下周細(xì)胞呈不規(guī)則三角形或多角形,胞體扁平、寬大。毛細(xì)血管周細(xì)胞的表面抗原標(biāo)記物PDGFR-β和NG-2呈陽(yáng)性表達(dá)(圖1)。2.2 輸注周細(xì)胞后對(duì)大鼠肺靜脈上周細(xì)胞數(shù)量的影響

肺血管FITC-BSA滲漏結(jié)果示,與假手術(shù)組比,失血性休克組(血壓30 mmHg,維持3 h)大鼠肺組織FITC-BSA平均光密度值增加近3倍(P<0.01)。乳酸林格氏液治療12 h后,肺組織FITC-BSA平均光密度部分降低,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與LR組比,PC治療12 h后,大鼠肺組織FITC-BSA平均光密度值降低40%。提示PC可以顯著改善失血性休克所致的肺血管滲漏,見(jiàn)圖3。圖3 周細(xì)胞對(duì)失血性休克大鼠肺血管通透性的影響

透射電鏡觀察結(jié)果示,與假手術(shù)組比,失血性休克組(血壓30 mmHg,維持3 h)內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接明顯破壞。乳酸林格氏液治療12 h后,緊密連接開放程度輕微降低。PC治療12 h后,緊密連接開放程度顯著降低(圖6)。3 討論
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