本文關(guān)鍵詞：鮑曼不動桿菌耐藥持留菌的形成機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumanmii)是一種重要的院內(nèi)感染致病菌,能夠引發(fā)呼吸道感染、泌尿系統(tǒng)感染等。鮑曼不動桿菌耐藥問題一直是臨床感染治療的最大障礙。持留菌的存在可能是其臨床治療失敗和感染復(fù)發(fā)的真正原因,同時也是導(dǎo)致耐藥率不斷上升的原因之一。近些年持留菌引起的耐藥問題受到廣泛重視,鮑曼不動桿菌持留菌的基本特征及形成機制的研究對于更好的控制持留菌引起的耐藥及感染問題具有重要的指導(dǎo)意義,也為其他物種中持留菌的研究提供理論依據(jù)。本研究以鮑曼不動桿菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC 19606為研究對象,開展鮑曼不動桿菌耐藥持留菌的基本特征及其形成機制的研究。首先檢測了鮑曼不動桿菌的生長曲線和抗生素抗性譜。生長曲線測定結(jié)果幫助確定鮑曼不動桿菌的對數(shù)期與平臺期的培養(yǎng)時間�？剐宰V的測定結(jié)果與美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)制定的標(biāo)準(zhǔn)比較發(fā)現(xiàn)鮑曼不動桿菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC 19606抗生素的抗性水平較低：對多數(shù)(9/13)抗生素敏感,僅對氨芐西林(AMP)和頭孢吡肟(CPM)耐藥。這些結(jié)果為后續(xù)實驗時間點的選取和抗生素的選擇提供了實驗依據(jù)。為了了解持留菌形成特點及規(guī)律,本研究首先優(yōu)化了分離及定量鮑曼不動桿菌的持留菌細(xì)胞的方法,比較了不同的生理狀態(tài)下以及不同的抗生素壓力條件下鮑曼不動桿菌持留菌水平的差異情況。實驗結(jié)果表明鮑曼不動桿菌在持留菌的形成過程中具有與其他細(xì)菌類似的二相型死亡曲線,即大量敏感細(xì)菌快速裂解死亡,而持留菌的量維持相對穩(wěn)定。平臺期的細(xì)菌菌群中含有的持留菌比例要顯著高于對數(shù)生長期,說明鮑曼不動桿菌的持留菌水平與菌株的生理狀態(tài)密切相關(guān)。此外,持留菌的形成呈現(xiàn)出十分明顯的抗生素種類和濃度依賴性,不同的抗生素的死亡曲線的情況大不相同,其中多粘菌素B(PB)與高濃度的妥布霉素(TOB)具有消除持留菌細(xì)胞的能力。以上這些結(jié)果讓我們對鮑曼不動桿菌持留菌的基本特征有了進(jìn)一步的認(rèn)識。借助生物信息學(xué)工具對721株已測序的鮑曼不動桿菌基因組中可能的II型毒素-抗毒素系統(tǒng)(TA系統(tǒng))進(jìn)行了徹底的搜索,結(jié)果表明鮑曼不動桿菌持留菌的中II型TA系統(tǒng)十分多樣,包含至少15對的TA系統(tǒng)。我們挑選其中報道有功能的5對TA系統(tǒng),分別為RelB/RelE、HicA/HicB、GP49/Cro(HigB/HigA)、 HTH/GNAT及DUF497/COG3514系統(tǒng),在44株臨床多耐藥鮑曼不動桿菌菌株中的分布情況做了進(jìn)一步分析。結(jié)果表明,HTH/GNAT、GP49/Cro(HigB/HigA) 與DUF497/COG3514的分布十分廣泛廣泛,分別占總菌株的61%、56%和40%。另一方面, real-time PCR的方法對持留菌與非持留菌中II型TA系統(tǒng)的表達(dá)量進(jìn)行了確認(rèn),結(jié)果表明持留菌中3類II型TA系統(tǒng)(GP49/Cro (HigB/HigA)、 HTH/GNAT及DUF497/COG3514)的表達(dá)量要顯著高于非持留菌。以上結(jié)果表明3類Ⅱ型TA系統(tǒng)在持留菌形成過程中扮演重要角色。為了更為全面的了解持留菌形成及恢復(fù)生長過程中起主要調(diào)控作用的基因和通路情況,深入的認(rèn)識持留菌發(fā)生及轉(zhuǎn)化的調(diào)控機制,我們借助Miseq高通量測序平臺在轉(zhuǎn)錄組水平上對持留菌形成及恢復(fù)生長的整個過程中差異表達(dá)的基因和基因所富集到的通路進(jìn)行了分析。結(jié)果表明在加入抗生素的第一個小時和重新培養(yǎng)的第5小時差異表達(dá)的基因數(shù)目最多,上調(diào)和下調(diào)2倍的基因數(shù)目分別是898個、566個和704個、964個。差異表達(dá)的基因所富集的通路分析結(jié)果表明碳水化合物代謝途徑和能量代謝途徑在持留菌形成和恢復(fù)生長過程中均有表達(dá),而異源物質(zhì)的生物降解途徑在持留菌形成階段特異存在,推測異源物質(zhì)降解相關(guān)基因在持留菌形成過程中扮演了重要角色。聚類分析找到了一些在持留菌時期表達(dá)量升高而在持留菌恢復(fù)生長時下降的基因,另外對4類TA系統(tǒng)的表達(dá)情況的結(jié)果表明GP49(HigB)/Cro(HigA)、DUF1044/RelB這兩對TA系統(tǒng)在持留菌的潛伏期(E1-E3)顯著升高。這些基因可能在持留菌形成過程中發(fā)揮了重要作用�？傊�,鮑曼不動桿菌持留菌的形成機制是極為復(fù)雜的,后續(xù)我們將進(jìn)一步縮小這一范圍并開發(fā)有效的控制持留菌感染的新方法。
【關(guān)鍵詞】：鮑曼不動桿菌 持留菌 細(xì)菌耐藥 毒素-抗毒素系統(tǒng)
【學(xué)位授予單位】：安徽大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R378
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 持留菌的研究現(xiàn)狀(文獻(xiàn)綜述)9-17
• 1.1 持留菌的發(fā)現(xiàn)9-10
• 1.2 可遺傳的耐藥與不可遺傳的耐藥10-11
• 1.3 持留菌形成的主要機制11-13
• 1.4 持留菌研究的實驗系統(tǒng)及持留菌的清除13-15
• 1.5 本研究的目的和意義15-17
• 第二章 鮑曼不動桿菌持留菌特征分析17-28
• 摘要17
• 2.1 前言17-18
• 2.2 材料和方法18-21
• 2.3 結(jié)果和分析21-26
• 2.4 小結(jié)26-28
• 第三章 臨床鮑曼不動桿菌中Ⅱ型毒素-抗毒素系統(tǒng)多樣性及其與持留菌形成的潛在聯(lián)系28-38
• 摘要28
• 3.1 前言28-29
• 3.2 材料和方法29-32
• 3.3 結(jié)果和分析32-36
• 3.4 小結(jié)36-38
• 第四章 鮑曼不動桿菌持留菌形成及恢復(fù)生長過程中轉(zhuǎn)錄組分析38-57
• 摘要38
• 4.1 前言38-40
• 4.2 材料和方法40-44
• 4.3 結(jié)果和分析44-56
• 4.4 小結(jié)56-57
• 參考文獻(xiàn)57-64
• 致謝64-65
• 發(fā)表論文、申請專利或其它研究成果情況65

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 姜北;黎庶;胡曉梅;;持留菌研究方法的新進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2014年06期

2 吳艷霞;熊靜遠(yuǎn);田蓮田;裴曉方;Yunrong Chai;;微生物持留菌與醫(yī)療衛(wèi)生[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2014年05期

3 陸宇;高孟秋;趙偉杰;王彬;馬麗萍;朱莉貞;;結(jié)核分枝桿菌持留狀態(tài)體內(nèi)外模型的建立與檢測[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2007年03期

4 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 趙雁林;趙冰;端木宏謹(jǐn);李傳友;;建立結(jié)核分枝桿菌持留菌模型和比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法[A];2004年中國防癆協(xié)會臨床基礎(chǔ)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 韓儉;金黃色葡萄球菌持留菌和L-型形成機制研究[D];蘭州大學(xué);2014年

2 高孟秋;結(jié)核分枝桿菌持留菌的檢測及臨床意義探討[D];北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所;2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 馬亞男;鮑曼不動桿菌耐藥持留菌的形成機制研究[D];安徽大學(xué);2015年

2 姜北;金黃色葡萄球菌轉(zhuǎn)座子突變文庫構(gòu)建與持留性突變株研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：鮑曼不動桿菌耐藥持留菌的形成機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：284020