本文關(guān)鍵詞：不同方式注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的1.體外擴(kuò)增并鑒定骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2.制備潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型;3.對(duì)比通過(guò)心臟及鼠尾靜脈兩種方式注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型的療效,并分析可能的治療機(jī)制。方法體外擴(kuò)增培養(yǎng)雄性SD大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,利用流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞表面抗原CD34、CD44、CD45及CD90的表達(dá),并在一定條件下誘導(dǎo)其向脂肪細(xì)胞系、骨細(xì)胞系分化。用5%TNBS/乙醇灌腸建立UC大鼠模型,并設(shè)定正常對(duì)照組D,觀察大鼠一般情況變化。模型建立后24小時(shí),A組大鼠通過(guò)心臟注射干細(xì)胞懸液0.5毫升(含干細(xì)胞1×106個(gè)),B組由鼠尾靜脈注射干細(xì)胞懸液0.5毫升(含干細(xì)胞1×106個(gè)),C組由鼠尾靜脈給予等量的生理鹽水,D組不做任何處理,繼續(xù)觀察各組大鼠一般情況變化。移植后7天觀察計(jì)算大鼠疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分,并將其處死,光鏡下觀察結(jié)腸組織病理變化,及人性別確定區(qū)Y蛋白(Human Sex-determining region Y protein,SRY蛋白)、G-蛋白偶聯(lián)受體5(Leucine-rich repeat containing G protein coupled receptor 5,LGR-5)、自殺相關(guān)因子(Factor Associated Suicide,FAS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(inducible Nitric Oxide Synthase,i NOS)的表達(dá)。結(jié)果1.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞有貼壁生長(zhǎng)特性,呈長(zhǎng)梭形,漩渦狀生長(zhǎng),經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè),CD34陽(yáng)性率為0.78%,CD44陽(yáng)性率99.38%,CD45陽(yáng)性率0.43%,CD90陽(yáng)性率為98.78%,且一定條件下有成脂及成骨能力。2.用TNBS/乙醇灌腸后一天,發(fā)現(xiàn)大鼠懶動(dòng),大便為稀便,體重下降,灌腸后三天癥狀最為嚴(yán)重。3.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植后,A組大鼠的DAI評(píng)分較B組的低,B組大鼠的DAI評(píng)分比C組的低,三組不全相等,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=90.603,p0.05),但A、B組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C組結(jié)腸病理見(jiàn)大量淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)及巨大潰瘍,A組上皮破損范圍較B組小,炎癥狀況較輕;在干細(xì)胞注射組的大鼠體內(nèi)均可見(jiàn)SRY蛋白,在A組的分布較B組多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=15.224,p0.05);LGR-5在移植組的表達(dá)較C組明顯增加,且A組高于B組,三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=24.7,p0.05);Fas在C組的表達(dá)高于D組(t=9.494,p0.05),Fas在移植組的表達(dá)較C組降低,且A組較B組低,三組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=38.6,p0.05);在干細(xì)胞注射組的i NOS的表達(dá)較C組下降,并且A組較B組的表達(dá)更低,三組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=33.8,p0.05)。結(jié)論經(jīng)心臟注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的療效優(yōu)于經(jīng)鼠尾靜脈注射;其可能有促進(jìn)腸道干細(xì)胞的再生,減輕腸道細(xì)胞的凋亡,抑制免疫反應(yīng),減輕炎癥、氧化應(yīng)激的作用,以此改善潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的臨床癥狀。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 大鼠 移植 潰瘍性結(jié)腸炎
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R-332;R574.62
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 第一部分 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定13-26
• 材料與方法13-17
• 結(jié)果17-21
• 討論21-22
• 結(jié)論22
• 參考文獻(xiàn)22-26
• 第二部分 不同方式注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型鼠的療效對(duì)比26-47
• 材料與方法26-33
• 結(jié)果33-39
• 討論39-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 附錄47-48
• 致謝48-49
• 綜述49-56
• 參考文獻(xiàn)54-56

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 宮健偉,苑述剛,阮時(shí)寶;對(duì)免疫方法制作潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型的探討[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2005年02期

2 張濤;謝建群;;大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志;2006年04期

  本文關(guān)鍵詞：不同方式注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：281455